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同型半胱氨酸对脑微血管内皮细胞炎性损伤的实验研究及机制探讨

孙文萍  
【摘要】: 血浆中总同型半胱氨酸(tHcy)水平增高作为动脉硬化性脑血管病的一项危险因素越来越受到人们的重视,其中血管内皮细胞功能障碍是同型半胱氨酸(Hcy)一项重要的致病机制。脑微血管内皮细胞(BMEC)是构成血脑屏障(BBB)的重要成分,是脑血管疾病的病理生理学研究的重要模型。本课题旨在研究Hcy对脑微血管内皮细胞的损伤,并对其损伤机制进行探讨。首先建立原代培养大鼠脑微血管内皮细胞法;采用细胞存活试验(MTT)检测不同浓度Hcy对BMEC的抑制作用;对NF-κB的检测采用免疫细胞化学法和western blot法;对ICAM-1的检测采用免疫细胞化学法和流式细胞术(FCM);采用RT-PCR法检测凋亡相关基因Bcl-2及Bax的表达变化。结果表明,1 mmol/L浓度的Hcy具有明显的细胞毒性作用,可抑制BMEC的生长,引起细胞凋亡,使核转录因子NF-κB及其下游细胞间粘附分子ICAM-1、凋亡基因Bax的表达增加,Bcl-2表达下降。提示,ICAM-1及Bax、Bcl-2的表达变化可能是由NF-κB活化途径介导的。本研究利用BMEC观察了Hcy的内皮毒性作用,发现了NF-κB活化途径在其中的重要位置,为进一步探讨Hcy损伤脑血管内皮细胞的机制,寻求阻断这一机制提供了实验依据。


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