旋毛虫感染诱导的MCF-7乳腺癌细胞基因表达变化的研究

【摘要】： 本研究首先建立了旋毛虫感染诱导的抗MCF-7乳腺癌细胞的动物模型,采用抑制性消减杂交(SSH)技术成功构建了旋毛虫感染诱导的MCF-7乳腺癌细胞基因表达变化的cDNA消减文库,探索旋毛虫感染诱导的MCF-7乳腺癌细胞基因的表达变化。将BALB/c小鼠分为荷瘤11d前接种旋毛虫组和荷瘤11d后接种旋毛虫组。实验组小鼠分别接种不同剂量的旋毛虫,对照组皮下注射0.2mL生理盐水,每只小鼠的右后肢皮下接种4×106个MCF-7乳腺癌肿瘤细胞,并在荷瘤20d后剖检小鼠,测定小鼠体内肿瘤的体积、重量及抑瘤率,并检测T淋巴细胞亚群。结果发现旋毛虫对BALB/c小鼠体内的MCF-7肿瘤细胞的生长有一定的抑制作用,将两组间抑瘤效果进行比较,经统计学分析,荷瘤11d前接种旋毛虫组的抑瘤效果优于荷瘤11d后接种旋毛虫组,从而建立了旋毛虫感染诱导的抗MCF-7乳腺癌细胞动物模型。以该模型的实验组和对照组的肿瘤组织为研究对象,采用SSH技术成功构建了旋毛虫感染后诱导MCF-7肿瘤细胞上调基因表达消减文库,克隆目的基因片段大小分布在200-500bp之间,20个阳性克隆经测序BLAST比对,获得差异表达的已知功能基因8个和未知功能基因4个,8个为重复检出基因,其中RB基因可能与乳腺癌细胞的生长抑制有密切关系。利用反向Northern杂交技术对所获得基因的特异性表达进行了验证。本研究为深入探讨旋毛虫感染诱导MCF-7乳腺癌细胞基因表达变化与旋毛虫抗肿瘤机理的研究奠定了一定的基础。