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人羊膜上皮细胞与肌基膜管支架相容性的实验研究

殷迪  
【摘要】: 羊膜上皮细胞具有分泌多种神经营养因子的功能,其中脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor ,BDNF)、神经营养因子-3(neurotrophin-3,NT-3)是主要的神经营养因子,能促进和维持多种神经元的存活、生长和分化,在中枢神经系统的损伤修复中具有重要的作用。国内外许多学者利用羊膜上皮细胞的神经营养作用治疗脊髓损伤、缺血性脑损伤等中枢神经系统疾病,通过激活损伤部位神经元,诱导神经元轴突的再生,促进损伤脊髓的功能恢复。但是,再生的轴突很难长入远端的损伤的脊髓,而且容易形成脊髓空洞,因此应用可以穿越空洞的移植物桥接脊髓、增强损伤轴突的再生能力,是治疗脊髓损伤的关键。肌基膜管支架为羊膜细胞的生长提供了适宜的空间和环境,同时,可提供神经轴突再生的管道,桥接损伤的脊髓,使神经轴突越过移植区到达脊髓损伤的远端。 本实验利用化学去细胞方法制作肌基膜管支架;应用免疫组织化学技术检测肌基膜管支架中羊膜细胞的增殖活性、NT-3及BDNF的表达;采用扫描电子显微镜观察羊膜上皮细胞在肌基膜管上的生长情况。结果表明,肌基膜管中肌细胞成分已消失。免疫组织化学染色显示,支架中BrdU阳性细胞数目多,提示羊膜上皮细胞具有增殖能力。支架中的羊膜细胞含有NT-3、BDNF阳性颗粒,提示具有神经生物学活性,能够分泌神经营养因子BDNF和NT-3。扫描电子显微镜观察,肌基膜管支架呈规则平行的管道结构,羊膜上皮细胞生长状况良好。细胞呈凸起球状物,有短小的突起,细胞之间有相互接触。 综上所述,通过对人羊膜上皮细胞在肌基膜管支架中生长情况的观察,证明羊膜上皮细胞与肌基膜管支架具有生物相容性,从而为开展组织工程治疗神经系统损伤性疾病提供了理论和实验依据。


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