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青霉素结合蛋白克隆表达及在牛乳青霉素残留检测中的应用

李铁柱  
【摘要】: 利用源于肺炎链球菌的青霉素结合蛋白PBP 2x对于β-内酰胺类抗生素具有高度亲和力的性质,本文致力于提出基于受体(PBP 2x)分析快速检测牛乳中β-内酰胺类抗生素残留的新方法。 本文利用生物工程的方法,构建了青霉素结合蛋白PBP 2x的表达载体,并实现了其在大肠杆菌中的表达。其后,利用GST亲和层析方法成功的制备了纯化的青霉素结合蛋白PBP 2x。利用计算机模拟了PBP 2x与兽医临床常用的四种β-内酰胺类抗生素分子对接;建立了PBP 2x与β-内酰胺类抗生素反应的动力学模型,并以氨苄青霉素为例,通过试验测定了二者反应的基本动力学参数。 最后,本文提出了应用青霉素结合蛋白检测牛乳β-内酰胺类抗生素残留的新方法。


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