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口腔鳞状细胞癌组织中脆性组氨酸三聚体的实验研究

高颖  
【摘要】: 口腔鳞状细胞癌(OSCC)是口腔颌面部最常见的恶性肿瘤,发病率在头颈部肿瘤中较高,其恶性程度高预后差,发病机制尚不清楚。早期发现、早期诊断、早期治疗癌前病变是目前降低口腔鳞癌病死率的惟一途径。因此,分析口腔鳞状细胞癌的基因表达变化与组织病理学改变的相关性,探索其分子机制,可为进一步深入研究口腔癌的发生、发展及转归提供理论依据。 肿瘤的发生发展取决原癌基因与抑癌基因相互作用的结果。抑癌基因在控制细胞生长、增殖及分化过程中起着十分重要的调节作用,其异常可促进肿瘤的发生和发展。脆性组氨酸三聚体(FHIT)基因是近年来发现的一种新型候选肿瘤抑制基因,其编码的FHIT蛋白能区域特异性地水解多磷酸二腺苷(APnAn=326)成二磷酸腺苷(ADP)和腺苷酸(AMP),参与细胞周期和细胞凋亡的调控。 本实验分四方面:第一用免疫组化技术检测FHIT蛋白在OSCC及癌前病变组织和正常组织中的表达情况,探讨FHIT蛋白表达降低及缺失在口腔癌变分子机制中的作用,具有重要的临床意义。第二进一步探讨OSCC中FHIT蛋白表达降低及缺失主要由于分子水平FHIT基因mRNA表达降低,采用巢式PCR及采用半定量PCR技术检测FHIT基因mRNA表达降低,在OSCC中FHIT基因的异常主要表现为等位基因的缺失、转录的异常以及FHIT蛋白表达的缺乏。第三研究FHIT基因mRNA表达降低、失活的主要机制:FHIT基因在OSCC组织中发生异常的主要表现为缺失及异常转录产物。采用PCR的方法检测FHIT外显子5、8。通过此次试验检测其异常转录,存在外显子纯和缺失。第四近年发现FHIT基因启动子异常甲基化是其表达降低的另一主要原因,位于基因5′端启动子区域的CpG岛发生甲基化是导致转录失活的重要原因。本试验用甲基化特异PCR方法测定48例OSCC及26例正常组织标本中FHIT基因的启动子区5'CpG岛甲基化。


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