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生长激素双向调节病毒载体系统在小鼠肌肉组织的表达及对生长的影响

戴建威  
【摘要】: 本研究采用腺相关病毒(AAV)与慢病毒(LV)介导基因转移技术,同时构建CMV与肌肉特异启动子(SP)双启动子真核表达载体,以期提高目的基因在肌肉组织的表达效率。首先构建了CMV-SP双启动子表达载体,检验其在非肌源细胞及肌源细胞中对外源基因的表达效率,结果证明双启动子载体在非肌源细胞中与CMV启动子效率相近,而在肌源细胞中明显提高,比单启动子载体均提高2倍以上。其次,生产双启动子启动的GHRH和HBsAg/SST单基因以及GHRH-HBsAg/SST双基因AAV病毒颗粒,并注射小鼠肌肉组织,结果显示AAV介导的双基因表达对小鼠的生长具有明显的促进作用,证实了GHRH与HBsAg/SST双基因共表达对动物的促生长具有协同作用。对动物血液中相关激素水平测定发现,GHRH与SST出现了拮抗作用。最后选用LV作为基因转移载体介导GHRH,观察对动物生长影响,并与AAV载体相比较,结果表明LV载体对动物生长持续性更优于AAV。本研究为寻求高效的基因表达系统,实现对GH的双向调节,开发新一代提高动物生产性能的长效促生长制剂打下了基础。


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