收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

禽流感重组枯草芽孢杆菌的构建及实验免疫研究

陈晓月  
【摘要】: 为研制安全有效并能常温保存的粘膜免疫AIV疫苗,本研究采用枯草芽孢杆菌(B.S.)识别的启动子和信号肽构建了表达载体pBC38C,并将GFP基因克隆到pBC38C中,筛选阳性重组质粒,转化入B.S.,阳性菌的菌体和菌落均有明显荧光,证实了表达载体能实现外源基因在B.S.中表达。 在选择压力条件下,质粒遗传稳定率为96 %左右,无选择压力下,稳定性下降,为56 %左右。以lacZ为报告基因,测定表达载体的活性,β-半乳糖苷酶活性最高为26 mU/mL。对小鼠进行大剂量、长时间饲喂,结果证实菌株对动物安全,能非特异性地提高小鼠细胞免疫水平。将AIV H5N1 HA基因克隆到pBC38C中,构建HA基因重组B.S.,以CTB为基因佐剂,Western blot、IFA等检测表明,HA基因在B.S.中得到表达。小鼠免疫试验结果表明,所构建的重组菌能刺激小鼠产生较高水平的抗AIV HA特异性细胞免疫和粘膜免疫以及低水平的体液免疫,CTB作为粘膜免疫佐剂,能提高粘膜免疫水平。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 郭志儒;一种新型粘膜免疫佐剂──氧化甘露聚糖[J];中国兽医学报;2002年02期
2 马兴元,赵玉军,郑文云,姜力,朱平;大肠杆菌热敏毒素研究概况[J];动物医学进展;2001年02期
3 刘明坤;刘昌财;许志茹;魏志刚;阎秀峰;刘关君;;一种快速构建35S组成型植物双价表达载体的方法[J];生物技术通报;2009年02期
4 杨桂香,彭险峰,曾振灵,陈杖榴;雌二醇依赖性的细胞表达载体的研究[J];中国农业科学;2005年05期
5 吴琼;张永亮;赵志辉;刘宇鹏;周立光;任晓慧;侯锋;章倩倩;吕铁钢;郝林琳;刘松财;;生长抑素基因靶向siRNA表达载体的构建及对生长抑素基因表达的抑制作用[J];中国兽医学报;2008年03期
6 町井博明;陈智毅;;外源基因在幼桑植株的表达[J];广东蚕丝通讯;1990年03期
7 郭骁才;外源基因高效转移与整合策略:人工引导转化系统[J];山西农业科学;2000年04期
8 Ingo Potrykus ,宋树恢;谷物的外源基因转移[J];世界农业;1991年01期
9 董建明;利用基因枪注导入外源基因[J];世界农业;1991年02期
10 邹钧;谢岳峰;刘东;朱作言;;外源基因在鲫鱼胚胎发育过程中的表达[J];水生生物学报;1991年04期
11 史元元;哺乳动物胚系外源基因的导入及表达[J];兽医大学学报;1987年02期
12 章力建,陈乐玫,袁静,贾士荣,许宁,赵南明;超声波法直接导入外源基因——高效烟草转化系统的建立[J];中国农业科学;1990年05期
13 牛自勉;胡桃外源基因转移在美国获得成功[J];河北果树;1991年02期
14 章力建,陈乐玫,袁静,李长公,贾士荣,许宁,赵南明;超声波法直接导入外源基因——高效烟草转化系统的建立[J];中国农业科学;1991年02期
15 赵浩斌,陈尚萍,孙永华,汪亚平,朱作言;外源基因在鱼类胚胎中表达与整合的时序[J];科学通报;1999年22期
16 申琳,生吉萍,罗云波;番茄外源基因转化系统的研究[J];中国农业大学学报;1998年05期
17 张靖溥,劳为德,张旭晨,魏影允,刘晔;外源基因在转基因小鼠中遗传和表达的稳定性[J];遗传学报;1999年02期
18 李晓晖;徐珠洁;梁胜华;蒋欣茵;任大明;;嘌呤核苷磷酸化酶温敏型表达载体的构建、表达及应用于腺苷转化的研究[J];河南农业大学学报;2007年04期
19 栾凤侠,陶波;小麦贸易及转入外源基因研究进展[J];黑龙江农业科学;2005年01期
20 R. R. Mendel ,王卉;外源基因向大麦转移[J];麦类作物学报;1992年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 徐琳;梁秀龄;徐评议;谢秋幼;汤其强;陈曦;王尚武;朱雅南;;肝脏特异性表达载体kbpala-ALB-ATP7B的构建及表达[A];中华医学会第七次全国神经病学学术会议论文汇编[C];2004年
2 郭国宁;;pIRES2-EGFP/cbfa1真核双表达载体的构建及鉴定[A];第十一次全国急诊医学学术会议暨中华医学会急诊医学分会成立二十周年庆典论文汇编[C];2006年
3 黄梅;袁仕取;朱作言;;红鲤外源基因的检测与定位[A];中国细胞生物学学会第七次会议论文摘要汇编[C];1999年
4 辛静;兰丽珍;王明烨;;人过氧化物酶体增殖物激活受体γ-胰高血糖素样肽-1表达载体的构建[A];中华医学会第十二次全国内分泌学学术会议论文汇编[C];2013年
5 张瑞军;田志刚;魏海明;孙汭;冯进波;赵跃然;张捷;;重组人白细胞介素-18表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达[A];第七届全国肿瘤生物治疗学术会议论文集[C];2001年
6 向伟;何小解;马燕琳;易著文;郑维;曹艳;赵水平;马志超;吴明;符生苗;马建林;王洁;康红;;维生素D受体特异性siRNA表达载体的构建[A];第11届全国脂质与脂蛋白学术会议论文汇编[C];2012年
7 颜景斌;朱怡文;肖艳萍;王舒;任兆瑞;黄淑帧;曾溢滔;;外源基因在转基因小鼠中整合状况的分析[A];中国生物工程学会2006年学术年会暨全国生物反应器学术研讨会论文摘要集[C];2006年
8 施定基;;蓝藻中外源基因表达的调控[A];中国藻类学会第十一次学术讨论会论文摘要集[C];2001年
9 刘晓艳;方红;羊正纲;张好;阮黎明;蒋筱凌;;HPSE基因siRNA表达载体的构建及其沉寂作用[A];中华医学会第14次全国皮肤性病学术年会论文汇编[C];2008年
10 马慧;赵开军;徐正进;;含芥菜几丁质酶基因的双元表达载体的构建[A];2003年全国作物遗传育种学术研讨会论文集[C];2003年
中国博士学位论文全文数据库 前4条
1 孙凌云;利用马铃薯内生菌Bacillus megaterium PE1表达小鼠干扰素-γ和家蚕素Ⅱ的研究[D];山东农业大学;2015年
2 史红艳;柯萨奇病毒B4单、双siRNA表达载体的构建及其抗病毒作用研究[D];吉林大学;2006年
3 孔庆然;外源基因在转基因猪中遗传和表达的稳定性[D];东北农业大学;2010年
4 张艳;HBsAg真核表达载体的构建及在CHO细胞高效表达的研究[D];吉林大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 刘涛;基于AIV的3D手机立体图像合成算法及虚拟视点合成算法研究[D];天津大学;2014年
2 王卫华;高表达耐热链霉菌acyB基因及其固定化发酵生产AIV研究[D];天津大学;2014年
3 王海明;2014~2016年东营及盐城地区野鸟与家禽中AIV监测及其遗传进化研究[D];山东农业大学;2016年
4 高丁梅;内含子介导的TBSV病毒表达载体的研究[D];宁夏大学;2015年
5 范超;小麦抗赤霉病基因表达载体的构建及鉴定[D];华中农业大学;2015年
6 叶博;利用柞蚕核型多角体病毒表达载体系统表达人生长激素的研究[D];大连理工大学;2015年
7 盛婷;COX-2过表达载体的构建及其在HSCs中的表达[D];南华大学;2015年
8 杨阳;GnRH类似物基因串联表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达[D];济南大学;2015年
9 杨海洋;植物抗病抗逆相关基因表达载体的构建[D];华中农业大学;2013年
10 徐雷;IL-7直核表达载体的构建及稳定表达[D];西北民族大学;2016年
中国重要报纸全文数据库 前3条
1 本报记者 丁洪美;巧妙改变遗传密码培育新品种[N];中国绿色时报;2009年
2 卞晨光;推开一扇窗 打通一条路[N];科技日报;2008年
3 云南省家畜改良工作站 赵开典;牛繁殖新技术[N];云南科技报;2007年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978