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莱姆病分子生物学和诊断新技术的研究

于东冬  
【摘要】: 莱姆病是一种新发现的人兽共患性传染病,临床可表现为多器官的损害,严重者终身致残甚至死亡。莱姆病临床症状表现多样,易与其它疾病相混淆,因而实验室诊断结果极为重要。目前实验室诊断方法各有其优点和局限性。故探求一种简便、快捷、可现地检测的诊断方法尤为重要。 莱姆病外膜蛋白A(OSPA)产生抗体持续时间长,与其他微生物的交叉反应性低,并具有良好的免疫原性,本文应用PCR方法开展吉林地区流行病学研究,研究结果表明吉林地区为莱姆病自然疫源地。 首次将表面等离子体子共振(SPR)技术应用于莱姆病诊断,原创性建立莱姆病SPR诊断新技术并开发实验装置一套,不同免疫复合反应体系SPR传感器光谱共振峰位不同,因此交叉反应几乎无影响;另外可以通过优化光谱分辨率提高检测灵敏度。实验结果证明,该方法特异度高(实验中无假阳性)、灵敏度高、检测时间短,有利于现地检测。 首次采用半导体量子点荧光免疫分析技术建立莱姆病诊断新技术。半导体量子点(QDs)具有发射强度和光化学稳定性强、光漂白域值高、可通过物理尺度调控发射峰位、光谱覆盖范围宽、荧光发射峰窄而且对称的高斯分布等特点。该方法灵敏度高,检测时间短,另外检测体系荧光共振能量转移获得的检测波长明显区分于背景,方法具有高特异度。 基于波长型SPR传感器可以实时获得抗原/抗体复合反应信息,并能够精确计算出结合常数的优势,首次发展莱姆病基因型现场筛查技术,实验结果证明,该技术可为莱姆病发病机理、治疗和疫苗开发研究提供有力的工具。


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