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黄连解毒汤化学成分分析及其抗高脂血症作用的研究

金瑾  
【摘要】: 首次利用LC-MS对黄连解毒汤(Huanglian Jiedu Decoction,HJD)、黄连解毒汤拆方及其它们的入血成分进行了分析,归属了黄连解毒汤的成分来源;根据黄连解毒汤LC-MS数据信息和标准品小檗碱、黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷、汉黄芩素和栀子苷的LC-MS信息,推断了黄连解毒汤中14个吸收入血的化学成分;利用HPLC检测了黄连解毒汤及其拆方中小檗碱和黄芩苷的含量,总结出小檗碱的溶出量随配伍药味的增加而递减,黄芩苷的溶出量随配伍药味的增加而递增的变化规律。 首次研究了黄连解毒汤对高脂饲料诱导的大鼠高脂血症的预防作用:1.黄连解毒汤对异常血脂有明显的调节作用,致使动脉硬化指数(AI)、冠心病指数(R-CHR)和ApoB/ApoA1比值(与心肌梗死有明显相关性)明显下降;2.通过提高机体对自由基的清除能力,减轻高脂血症对机体的损伤程度;3.黄连解毒汤明显升高血浆LPL及HL活性,防止动脉硬化的发生。 进一步研究发现,黄连解毒汤通过以下途径预防高脂血症的发生:1.促进高脂血症大鼠肝脏PPARγ的表达水平,保护肝功能,平衡脂代谢;2.上调LDLR基因表达水平,进而促进脂蛋白脂肪酶(LPL)基因转录,提高血浆LPL含量,提高清除LDL-C的能力;3.上调肝细胞中的LXRα表达水平,增强胆固醇逆转运、分解和代谢。 为探讨黄连解毒汤调脂作用的物质基础,我们选择以黄连解毒汤及其拆方的含药血清为研究对象。发现,1.黄连解毒汤及黄芩栀子共煎剂的含药血清能促进HepG2细胞中LDLR和LXRα的表达,抑制PPARγ表达水平的下降;2.上述含药血清还能明显抑制小鼠前脂肪3T3-L1细胞的分化。3.其它拆方含药血清的生物活性远不及全方和黄芩栀子药对。 上述研究结果提示:1.黄连解毒汤调控PPARγ、LDLR和LXRα的基因转录水平是其抗高脂血症的重要作用机制;2.中药复方(黄连解毒汤)整体用药调节脂代谢,具有明显的协同增效作用;3.黄连解毒汤调节血脂和促进PPARγ、LDLR和LXRα基因转录的激动剂(有效成分)存在于黄芩栀子的共煎剂中,或为共煎剂吸收入血的代谢产物。 利用计算机模拟筛选技术对已知的黄连解毒汤组成药中107个化合物进行调脂药物靶点LXRs选择性激动剂筛选,提示黄连解毒汤中可能存在选择性激活LXRβ的活性分子。分析对接结果,发现黄芩苷对LXRβ的激动作用最强。 以上的研究工作为黄连解毒汤的药效物质基础及调脂活性的深入研究提供了一定的理论和实验基础。


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