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药物小分子及其与生物大分子相互作用的光谱研究

孙艳涛  
【摘要】: 本论文主要应用荧光光谱法和紫外-可见光谱法研究了药物测定及药物小分子与生物大分子的相互作用。 1、应用不同的计算公式研究了小分子探针和生物大分子相互作用的结合参数和结合位点数。 2、通过蛋白内源荧光的猝灭研究了陈皮中两种活性成分同BSA和HSA的相互作用。利用推导的计算结合常数的方程和计算机计算程序得到了橙皮苷和柚皮苷同蛋白作用的结合常数和结合位点数,并与两种常见计算结合常数公式得到的结果进行了比较。结果发现,利用本文所建立的方法计算快速、结果合理。同时,用荧光和吸收光谱法研究了常见四种金属离子对橙皮苷和柚皮苷同两种蛋白相互作用的影响。 3、利用荧光法测定了牛蒡子苷。根据DNA与牛蒡子苷共存时的荧光光谱和紫外光谱。建立了一种新的计算结合常数的方法,得到了牛蒡子苷与DNA的结合常数。为了进一步阐明牛蒡子苷与DNA的结合机理,进行了竞争结合实验和熔解实验。研究结果表明,牛蒡子苷与DNA的结合应当是沟区结合。荧光法的结果还表明单链DNA的猝灭效应大于双链DNA,这意味着牛蒡子苷与DNA的作用不属于嵌入结合。 4、利用荧光光谱法测定了鬼臼毒素、甘草苷和红景天苷,建立了测定这些化合物的方法。研究并选择了它们的最佳激发和荧光发射参数,详尽地考察了乙醇浓度、温度、放置时间、pH值和共存离子对荧光强度的影响。在最佳实验条件下,鬼臼毒素、甘草苷和红景天苷的荧光强度与其浓度分别在0.04~8.29μg·mL~(-1),0.04~8.37μg·mL~(-1)和0.04~18.03μg·mL~(-1)范围内呈良好的线性关系,检测下限分别为0.024,0.017和0.019μg·mL~(-1)。


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