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GDNF基因修饰的雪旺细胞对大鼠脊髓损伤保护作用的实验研究

王旭凯  
【摘要】: 脊髓损伤(Spinal cord injury, SCI)是外科常见的创伤性疾病,由于创伤后运动神经元的变性和轴突的断裂、降解而导致神经退行性改变或者运动功能的障碍。脊髓损伤后的神经修复一直是困扰医学界的难题。随着分子生物学的发展,基因治疗成为SCI治疗的重要手段之一,其疗效主要决定于目的基因和载体系统的选择。由于雪旺细胞(Schwann cells,SCs)易于获得和培养,植入宿主后能在宿主体内长期存活并能继续分裂,这些特性使其具有更广阔的应用前景。本研究旨在体外分离培养SCs,利用分子生物学技术,将胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotropic factor,GDNF)一种对神经元的发育、分化和存活具有重要作用的神经营养因子,通过脂质体导入SCs,观察其对脊髓神经元细胞凋亡基因的调控作用进而初步阐述其促进脊髓损伤的修复作用的机制,结果显示:在体外成功分离和鉴定得到的高纯度的SCs;成功将GDNF基因通过脂质体转染导入SCs,并且基因修饰后的SCs能持续稳定高水平的表达分泌GDNF;应用自制脊髓损伤模型打击装置成功制备大鼠脊髓损伤模型;通过体内和体外实验证实GNDF基因修饰的SCs通过调控凋亡基因的表达,主要是Bax表达下调,Bcl-2表达上调,抑制脊髓神经元细胞凋亡,促进脊髓损伤的修复。


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