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猪瘟病毒E2蛋白主要免疫显性抗原多肽原核表达及初步应用

王异民  
【摘要】: 猪瘟是由猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV )引起,主要侵袭家养的猪及野猪,引起高发病率、高死亡率的烈性传染病。近20年,世界各国的猪瘟流行形式和发病特点都发生了很大的变化。美国,加拿大,欧洲的几个国家先后消灭了猪瘟,但是野猪中还是存在有猪瘟病毒。我国猪瘟状况也不例外,普遍出现了长期持续存在多点散发性猪瘟,临床上表现为非典型、温和型、亚临床和无症状的隐性感染。定期实行的猪瘟免疫抗体水平监测是针对我国控制和消灭猪瘟的最有效的辅助方法。本研究就是表达猪瘟病毒E2基因蛋白的主要抗原区,来作为抗原检测猪瘟抗体。 本研究根据GeneBank中公布的猪瘟病毒C-株的E2基因序列设计了一对特异性引物,构建E2基因的原核表达载体pGEX-6P-1-E2,转化到宿主菌BL21(plys)内经IPTG诱导表达得到目的蛋白,经过Western-blot方法检测表达的目的猪瘟E2蛋白具有良好的与抗体结合的反应原性。 在此基础上进行了初步应用。采用Dot-ELISA的方法检测了某猪场的猪只猪瘟抗体,结果与所送检的结果一致。 本实验的结果可以为今后进一步建立准确、特异、敏感、快速的猪瘟病毒诊断方法奠定基础。


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