收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

重组MUC1-MBP融合蛋白疫苗抗肿瘤作用机制研究

方芳  
【摘要】: MUC1是Mucins黏蛋白家族的重要成员,因正常组织MUC1与肿瘤组织的差异使其成为理想的抗肿瘤靶分子。近年,国内外研制的以MUC1为靶点的疫苗包括糖疫苗、DNA疫苗、蛋白或多肽疫苗以及树突状细胞疫苗,部分已进入临床试验阶段。但在多种疫苗研究中发现蛋白或多肽疫苗具有良好的应用前景。但蛋白疫苗面临的主要问题是免疫原性弱、难以诱导细胞免疫应答等缺点。因此,如何提高疫苗的免疫原性,是当今肿瘤疫苗研究亟待需要解决的问题。本研究室为了提高MUC1的免疫原性将MUC1与大肠杆菌麦芽糖结合蛋白(Maltose binding protein,MBP)蛋白进行融合,制备了MUC1-MBP融合蛋白。初步研究发现MUC1-MBP融合蛋白能显著抑制小鼠Lewis肺癌LLC1和人乳腺癌MCF-7细胞的生长。本研究从特异性免疫和非特异性免疫应答两方面进一步深入探讨MUC1-MBP融合蛋白免疫调节活性,构建稳定转染MUC1的B16黑色素瘤细胞(B16-MUC1),利用B16-MUC1和不表达MUC1的B16-neo细胞建立动物模型,研究MUC1-MBP融合蛋白诱导的免疫应答在抗肿瘤中的作用。取免疫小鼠的血清分析MUC1特异性抗体;取免疫小鼠的脾细胞在体外用MUC1合成多肽刺激5~6天后,采用MTS检测特异性淋巴细胞增殖;采用ELISA检测特异性淋巴细胞分泌细胞因子;采用LDH方法检测特异性CTL对靶细胞B16-MUC1和B16-neo细胞的杀伤。研究结果表明MUC1-MBP融合蛋白只能诱导特异性体液免疫应答不能诱导细胞免疫应答; MUC1-MBP融合蛋白在BCG佐剂作用下,不仅能诱导产生MUC1特异性体液免疫应答,也能诱导MUC1特异性Th1和CTL应答。通过免疫小鼠脾细胞中NK细胞、巨噬细胞和树突状细胞(Dendritic cell,DC)分析结果表明,MBP蛋白能诱导NK细胞和巨噬细胞活化,不能诱导DC活化;BCG既能诱导NK细胞和巨噬细胞活化,也能诱导DC活化;MUC1与MBP偶联通过NK细胞和巨噬细胞活化增加MUC1的免疫原性;MUC1-MBP+BCG通过BCG增强了MUC1特异性细胞免疫应答。肿瘤预防实验和治疗实验结果表明,MUC1-MBP及MUC1-MBP+BCG无论对B16-MUC1和B16-neo细胞在早期均有抑制作用;在肿瘤后期只有MUC1-MBP+BCG组对B16-MUC1肿瘤细胞有显著抑制作用,而对B16-neo肿瘤细胞无抑制作用。上述结果提示MUC1-MBP+BCG诱导的非特异性免疫和特异性免疫均参与抗肿瘤作用,尤其在肿瘤晚期特异性细胞免疫应答发挥重要作用。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 朱俊铭;重组恶性疟原虫环子孢子蛋白疫苗的初步评估[J];国外医学.预防.诊断.治疗用生物制品分册;1998年02期
2 陶伊文;;一种克服子孢子疫苗缺点的设想[J];国际医学寄生虫病杂志;1991年03期
3 闻礼永;吴观陵;;日本血吸虫候选疫苗研究现状与展望[J];中国寄生虫学与寄生虫病杂志;2007年05期
4 张世勇;儿童B群脑膜炎球菌感染的预防:蛋白疫苗可诱导免疫记忆[J];国外医学.预防.诊断.治疗用生物制品分册;2002年03期
5 孙玉静;隋延仿;吴道澄;葛伟;叶菁;张秀敏;;MAGE1纳米蛋白疫苗的研制及其抗肿瘤效应[J];中华微生物学和免疫学杂志;2005年11期
6 史百芬;纯化的融合蛋白疫苗在RSV流行季节保护囊性纤维变性患儿抵抗下呼吸道疾病的效果[J];国外医学.预防.诊断.治疗用生物制品分册;1997年01期
7 廖芳;贺超;刘丽江;宋启发;万沐芬;杨振德;李雍龙;;淋球菌孔蛋白疫苗在动物体内诱导的免疫应答[J];中国妇幼保健;2005年24期
8 龙军;杨欣;曹荣月;吴洁;刘景晶;;抗动脉粥样硬化疫苗的免疫学效应研究[J];中国天然药物;2007年05期
9 ;治疗性乙肝蛋白疫苗有望打破乙肝免疫耐受态[J];透析与人工器官;2010年02期
10 熊新宇,陈元鼎;丙型肝炎病毒蛋白疫苗的研究进展[J];国外医学.病毒学分册;2004年03期
11 樊建勇;杨慧兰;王捷;关蕾;王颖;成桂明;仕瑶慧;;Hsp70-HSV-2gD融合蛋白疫苗阳离子脂质体的制备[J];中国麻风皮肤病杂志;2006年11期
12 叶嘉燕;胡向兵;邢芸;侯景;李飞;张帆;金亮;李泰明;刘景晶;曹荣月;;抗βhCG蛋白疫苗的抗肿瘤作用[J];药物生物技术;2010年05期
13 赵凯,张震宇,卢永干,郑兆鑫;抗口蹄疫蛋白疫苗与DNA疫苗混合物的免疫原性研究[J];中国人兽共患病杂志;2001年05期
14 方海红;imiquimod单独或与糖蛋白疫苗联合使用减少复发性HSV病[J];国外医学.预防.诊断.治疗用生物制品分册;2001年05期
15 苏焱;蛋白疫苗在婴儿中的潜力与限制[英][J];国外医学.预防.诊断.治疗用生物制品分册;1999年03期
16 余莉;孕前接种CMV糖蛋白疫苗对先天性CMV感染豚鼠模型的保护作用[J];国外医学.预防.诊断.治疗用生物制品分册;2001年05期
17 孙晗笑,刘杰;HIV感染的DNA疫苗和蛋白疫苗防治[J];国外医学.流行病学.传染病学分册;2001年05期
18 廖立新,曹郁生,李国辉,陈燕;铜绿假单胞菌外膜蛋白疫苗的制备[J];中华烧伤杂志;2005年03期
19 张申英;慢性乙型肝炎治疗性疫苗的应用研究[J];国外医学.流行病学.传染病学分册;2001年02期
20 程鲁向;重组2型单纯疱疹病毒(HSV-2)糖蛋白疫苗的安全性和效力[J];国外医学.预防.诊断.治疗用生物制品分册;1996年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 陈娟娟;;蛋白疫苗中佐剂应用进展[A];第六届全国免疫学学术大会论文集[C];2008年
2 姚志彬;汪华侨;邹俊涛;张革;徐杰;谢瑶;袁群芳;;阿尔茨海默病Aβ_(1-15)疫苗的实验研究[A];2008年全国抗衰老与老年痴呆学术会议论文集[C];2008年
3 何晓文;章亚男;何颖;李凯;姜磊;孙树汉;;乙肝DNA疫苗联合基因工程蛋白疫苗提高免疫效果的研究[A];首届长三角科技论坛——长三角生物医药发展论坛论文集[C];2004年
4 戴洋;朱荫昌;王晓婷;唐建霞;赵松;;日本血吸虫核酸疫苗体内电穿孔法的进一步研究[A];2011新型疫苗与抗体创制关键技术及质量控制研讨会论文集[C];2011年
5 盛彩虹;刘原君;齐蔓丽;刘全忠;;E型沙眼衣原体主外膜蛋白DNA疫苗和重组蛋白疫苗联合免疫诱导出的免疫效应[A];中华医学会第16次全国皮肤性病学术年会摘要集[C];2010年
6 尹晓琳;石新丽;魏林;马翠卿;王秀荣;冯惠东;李彩虹;;尿路致病性大肠杆菌Ⅰ型菌毛基因fimCH蛋白及核酸疫苗的免疫效果观察[A];河北省免疫学会第5次会员代表暨学术大会论文摘要集[C];2006年
7 尹晓琳;魏林;石新丽;马翠卿;王秀荣;冯惠东;李彩虹;;尿路致病性大肠杆菌Ⅰ型菌毛基因fimCH蛋白及核酸疫苗的免疫效果观察[A];中国免疫学会第五届全国代表大会暨学术会议论文摘要[C];2006年
8 孙玉静;隋延仿;吴道澄;葛伟;叶菁;张秀敏;;肿瘤基因工程纳米蛋白疫苗的研制鉴定及抗肿瘤效应的研究[A];中华医学会病理学分会2005年学术年会论文汇编[C];2005年
9 曹丽艳;张德林;张燕丽;芦赟;蔡志杰;王艳华;赵晋军;;弓形虫GJS株表面抗原1基因的原核细胞表达及其抗原性分析[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会论文集[C];2009年
10 王希良;罗德炎;曾政;周丽丽;张松乐;;布鲁氏菌病新型疫苗的初步研究[A];全国人畜共患病学术研讨会论文集[C];2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 宋欣欣;提高HPV融合蛋白疫苗疗效策略研究[D];中国协和医科大学;2010年
2 叶菁;热休克蛋白70与MAGE-1融合基因疫苗和蛋白疫苗的构建及体内抑瘤效应的研究[D];中国人民解放军第四军医大学;2003年
3 李晓楠;手足口病新型疫苗的初步研究[D];内蒙古农业大学;2010年
4 田建卿;抑胃多肽疫苗的构建及主动免疫后对大鼠行为学和脑功能的影响[D];第二军医大学;2010年
5 方芳;重组MUC1-MBP融合蛋白疫苗抗肿瘤作用机制研究[D];吉林大学;2010年
6 马加海;热休克蛋白70与MAGE-3融合蛋白疫苗和DNA疫苗的构建及抑瘤效应的研究[D];第四军医大学;2004年
7 郄亚卿;融合基因ag85B-mpt64_(190-198)-mtb8.4在抗结核新型重组卡介苗以及亚单位疫苗研究中的应用[D];复旦大学;2008年
8 千新来;1. 腺病毒5型E1A下游基因c-101抗癌和化疗增敏作用及相关机理的初步研究 2. 新型HPV-16 E6/E7融合蛋白疫苗抗癌及抗转移作用研究[D];中国协和医科大学;2005年
9 金昕晔;脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白疫苗预防高脂喂养小鼠胰岛素抵抗及动脉粥样硬化的实验研究[D];第二军医大学;2012年
10 古小彬;兔疥螨虫株的分子分类及其疫苗研究[D];四川农业大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 黎威;多价血吸虫蛋白疫苗的优选与原核表达研究[D];华中科技大学;2012年
2 赵莉群;重组金黄色葡萄球菌肠毒素B蛋白疫苗的制备及免疫效果评价[D];西北农林科技大学;2011年
3 崔珂;CpG ODN对口蹄疫重组蛋白疫苗增效作用的研究[D];吉林大学;2010年
4 赵明丽;DNA疫苗预敏蛋白疫苗增强策略对乙型肝炎病毒表面抗原蛋白免疫应答的影响[D];南京医科大学;2009年
5 戴志兵;抗淋病LTB-PorB核酸疫苗与重组蛋白疫苗联合免疫的免疫增强效应研究[D];南华大学;2010年
6 应上云;B群脑膜炎奈瑟菌重组NspA蛋白疫苗的免疫活性及其对小鼠的免疫保护作用[D];南华大学;2013年
7 苏雯静;乙型肝炎疫苗联合B7-H1蛋白疫苗对HBV转基因小鼠抗HBsAg免疫应答的影响[D];第四军医大学;2012年
8 肖春羽;黄芪多糖在白色念珠菌重组蛋白疫苗中免疫增强作用研究[D];东北师范大学;2013年
9 李英辉;异种表皮生长因子受体胞外段的表达及其抗肿瘤效果研究[D];西北农林科技大学;2008年
10 姜德华;结核分枝杆菌融合蛋白疫苗(Ag85B-ESAT6)的构建及免疫学特性研究[D];吉林大学;2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 本报记者 董长青;万克森:研制适合国人的蛋白疫苗[N];北京日报;2011年
2 彭勇;治疗性疫苗有望打破乙肝免疫耐受[N];南方日报;2005年
3 红民;艾滋病疫苗距离我们还有多远?[N];中国医药报;2007年
4 康存栋;突破我国水产疫苗研发和生产瓶颈[N];中国渔业报;2008年
5 喻菲 俞铮;曾毅院士:2010年完成艾滋病疫苗Ⅲ期临床试验[N];医药经济报;2006年
6 邵一鸣;国内外艾滋病疫苗的研究进展和发展趋势[N];人民政协报;2008年
7 刘文伊;治疗性乙肝疫苗进入临床[N];科技日报;2006年
8 张洪玉;重症慢阻肺需终身用药[N];健康时报;2006年
9 记者 徐亚平通讯员 永康 翠兰 昌英 青青;抗家畜血吸虫病疫苗试验获进展[N];湖南日报;2008年
10 张骁;人乳头瘤病毒感染及其防治对策[N];医药经济报;2000年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978