粉防己碱对喉鳞状细胞癌抑癌基因Brg1表达的影响及相关机制的研究

【摘要】： 本研究通过分析喉鳞癌组织中Brg1蛋白的表达,粉防己碱(Tet)对喉鳞状细胞癌细胞系中Brg1及相关基因表达的影响,探讨Brg1基因与喉鳞癌发生发展的关系,以及Tet的抗肿瘤机制。采用免疫组化方法分析Brg1在喉鳞癌组织中的表达,比较其在正常喉粘膜、声带息肉、喉癌前病变及喉鳞状细胞癌中的表达情况。采用免疫荧光法检测Tet对Hep-2细胞中Brg1表达的影响,采用MTT法检测不同浓度的Tet对喉鳞癌Hep-2细胞增殖的影响,采用流式细胞仪检测不同浓度Tet对细胞周期的影响,以及应用fluo-3检测Tet对细胞内钙离子浓度的影响,表明在喉鳞状细胞癌中Brg1表达下降,在喉癌发展过程中有重要作用。Tet可使Hep-2细胞中Brg1表达增强,抑制肿瘤细胞生长,并可使Hep-2细胞内钙离子浓度降低。采用免疫荧光法检测Tet对Hep-2细胞中受Brg1调节的钙调蛋白AHNAK的表达,并进一步应用实时RT-PCR方法检测细胞内Brg1和AHNAK mRNA水平,结果发现Tet可使Hep-2细胞内Brg1和AHNAK转录增强。表明Tet可使受Brg1调控的钙调蛋白AHNAK的表达增强,Brg1的表达可能与细胞内钙相关。Brg1作为一种抑癌基因在喉鳞状细胞癌中表达下降,可能与喉癌的发生密切相关。Tet为一中药抗肿瘤药物,可使Hep-2细胞中Brg1表达增强,其抗肿瘤作用可能通过影响Brg1表达而实现。