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白藜芦醇对LPS诱导的HUVEC细胞增殖及管型形成的影响

王溪唯  
【摘要】:目的:探讨白藜芦醇(resveratrol,Resv)对HUVEC细胞增殖和管型形成的影响及可能的作用机制。方法:通过MTT法的检测,观察不同浓度的LPS对HUVEC细胞增殖产生的影响;通过划痕法观察LPS对HUVEC细胞迁移能力产生的影响;通过血管形成实验检测细胞的管型形成;通过亚硝酸还原酶法检测一氧化氮(NO)的水平;RT-PCR 法检测 LPS 对 HUVEC 细胞中 CXCR4、VEGF、MMP-2、COX-2 和 iNOS的mRNA表达水平的影响,Western Blot法检测LPS对HUVEC细胞中p-ERK和p-JAK2的蛋白表达水平的影响。并且,检测Resv对LPS诱导的HUVEC细胞增殖、迁移、管型形成、NO分泌的影响;以及Resv对LPS诱导的HUVEC细胞中 CXCR4、VEGF、MMP-2、COX-2 和 iNOS 的 mRNA 表达水平,和 p-ERK及p-JAK2的蛋白表达水平的影响。结果:MTT结果表明,当LPS浓度为10 ng/ml时可促进HUVEC细胞增殖(P0.01);划痕实验结果表明,浓度为10 ng/ml的LPS可促进HUVEC细胞的迁移作用(P0.01);血管形成验结果表明,LPS可显著促进细胞的管型形成(P0.01);检测NO的亚硝酸还原酶法(Griess Reagent)实验结果显示,LPS可使细胞分泌的NO含量明显增多(P0.01);RT-PCR结果表明,LPS对HUVEC细胞中CXCR4、VEGF、MMP-2、COX-2和iNOS的mRNA表达有明显促进作用;Western Blot结果表明,LPS可以显著诱导HUVEC细胞内ERK和JAK2蛋白的磷酸化;同时,结果显示Resv可以对LPS诱导的HUVEC细胞增殖、迁移、管型形成和NO的分泌产生明显的抑制作用,明显降低LPS诱导的HUVEC细胞中 CXCR4、VEGF、MMP2、COX-2 和 iNOS 的 mRNA 表达水平;抑制 HUVEC细胞内ERK和JAK2蛋白的磷酸化。结论:Resv可显著抑制LPS诱导的HUVEC细胞增殖、迁移、管型形成和分泌NO的作用,其机制可能与下调趋化因子受体CXCR4、VEGF、MMP-2、COX-2和iNOS mRNA水平,抑制ERK及JAK2蛋白的磷酸化有关。


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