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毒蕈碱电流参与低渗牵张对豚鼠胃窦平滑肌细胞膜电位的调节

李林  
【摘要】: 随着本世纪70年代膜片钳技术的迅速发展,人们为揭示牵张刺激引起 平滑肌收缩的机制,做了大量工作。众多的研究结果表明,牵张刺激对不 同内脏平滑肌细胞膜的许多离子通道具有激活和调控作用。但是关于牵张 刺激与化学门控离子电流的关系,到目前为止研究甚少。为进一步探讨牵 拉引起胃平滑肌收缩的离子电流机制,并阐明作为化学门控电流的一种, 毒蕈碱受体门控的离子电流是否也参与这一过程,本工作运用全细胞模式 的膜片钳技术在急性分离的豚鼠胃窦环行肌单细胞上观察了牵张刺激对膜 电位以及毒蕈碱受体门控离子电流的影响,结果如下: 1.细胞外以等渗溶液(约300mOsm)灌流,用含10mmol/L EGTA的 电极内液充灌电极。在I-clamp状态下,将膜电位调至-60mV使其接近静息 膜电位。此时若将细胞外液换为低渗溶液(约202mOsm),则这种胞外渗 透压的变化可引起低渗性牵张刺激使膜电位从-60.0±1.0mV超极化至 1.摘 要 -679ti刀mVpeo刀5)。 2.细胞外仍以低渗液灌流,观察两种阻断剂对低渗牵张引起的膜电位 变化的影响。 (l)非选择性钾通道阻断剂 hA ( ommol/L)可明显抑制低渗牵张引 起的膜电位超极化。 门)氯通道阻断剂 Nfiundc acid* u mow)也明显抑制低渗牵张引起 的膜电位超极化。 3.毒革碱受体门控电流对低渗牵张引起的膜电位变化的影响 门)毒章碱受体阻断剂阿托品(Atropine,in moim)可增加低渗牵张 引起的膜电位超极化幅度。 u)受到低渗性牵张刺激后,加入毒茸碱受体激动剂 Carbachol*0 n mol几)可明显抑制低渗刺激引起的膜电位超极化,膜电位从-712士 1.smV去 极化至 -60.吕士 1.smV po.05)。 4.由上述几步实验的结果可知,低渗刺激引起的膜电位超极化可能主 要是因为钾电流和氯电流外向性流动的结果,所以将进一步在细胞内液及细 胞外液的KC和NaCI均用CsCI代替以阻断钾电流后观察低渗刺激时膜电 位的变化。结果发生去极化,从-60.0士 l.omV变化至力4.8士2.3mV (<0.05卜 5.在上一步实验结果的基础上,若加入毒审碱受体阻断剂阿托品(1 2 !.摘要 pmow),则会抑制低渗刺激引起的膜电位去极化。 6.同样细胞内外液的KCI和NaCI均被CsCI代替后,加入Carbachol *0 P p,可使膜电位从七00士1刀mV去极化至60.3士0.3mV,而且低渗牵张刺 激明显增强Carbachol的这一作用。 7.低渗性牵张刺激明显增加 Carbachol介导的毒章碱受体门控的离子 电流。 以上的实验结果提示:1.低渗牵张可通过外向性钾电流和容积敏感性 氯电流使细胞膜电位超极化,这一过程可能与细胞容积调节有关。2.毒章 碱受体激动剂Carbachol使膜电位去极化,低渗牵张可加强这一去极化作用。 3.低渗牵张通过增加毒审碱受体门控电流使膜电位去极化。4.毒审碱受 体门控的离子通道可能参与牵张刺激引起平滑肌收缩的机制。


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