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一氧化氮合酶抑制剂对小鼠肺癌血管形成的影响

严春花  
【摘要】: 目的:本实验旨在研究一氧化氮合酶(Nitric Oxide Synthase,NOS)抑制剂对小鼠肺癌血管形成的影响,并初步探讨其抑瘤机制,探讨血管形成(Angiogenesis)在肿瘤的生长、转移等方面的作用,展望肿瘤血管形成抑制剂的临床应用前景。 方法:取Lewis肺癌细胞,用生理盐水调整细胞密度至1×107个/ml,取0.1ml接种于体重为18~20g的雄性C57小黑鼠前肢腋下皮下成瘤后,接种小鼠随机分为2组,每组7只:(1)对照组;(2)治疗组。治疗组于接种后第一天起腹腔注射NOS抑制剂硝基左旋精氨酸甲基酯(NG-nitro-L-arginine methyl ester,L-NAME)100μl/日(5mg/kg体重),持续14天,对照组于接种后第一天起腹腔注射0.9%的生理盐水100μl/日,持续14天。于接种后第15天切开右腹股沟静脉,采取静脉血,离心,取血清保存于-20℃冰箱中备用。处死动物,剥离肿瘤,称取质量后放入10%甲醇溶液固定,取出两肺放入10%甲醇溶液固定。以HE染色后光镜下检测微血管密度(Micro Vessel Density,MVD);采用Envision System免疫组织化学方法检测血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF);ELISA法检测血清中一氧化氮(Nitric Oxide,NO)的含量;光镜下观察肺内转移灶。 WP=4 结果:(1)对照组与治疗组瘤重分别为(2.59±0.31)g、(1.80±0.33)g,治疗组瘤重明显低于对照组(P﹤0.01)。(2)对照组与治疗组MVD分别为(24.06±5.42)、(16.97±2.86),治疗组MVD明显少于对照组(P﹤0.01)。(3)对照组与治疗组癌组织中VEGF表达无明显差异。(4)对照组与治疗组血清中NO的含量分别为(33.26±12.5322)μmol/l、(14.56±7.1356)μmol/l,治疗组血清中NO含量明显低于对照组(P﹤0.01)。(5)对照组与治疗组光镜下观察肺内转移无明显差异。 结论:(1)NOS抑制剂L-NAME可抑制内源性NO的合成。(2)L-NAME通过抑制内源性NO的合成,抑制小鼠肺癌的血管形成,进而抑制肿瘤生长。(3)L-NAME可能不是通过抑制VEGF的生成而发挥抑制血管生成作用的,而是通过另外途径产生效应。(4)血管形成抑制剂可作为新的抑瘤药物,可能在肿瘤的治疗中具有良好的应用前景。


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