一氧化氮合酶抑制剂对小鼠肺癌血管形成的影响

【摘要】： 目的：本实验旨在研究一氧化氮合酶（Nitric Oxide Synthase，NOS）抑制剂对小鼠肺癌血管形成的影响，并初步探讨其抑瘤机制，探讨血管形成（Angiogenesis）在肿瘤的生长、转移等方面的作用，展望肿瘤血管形成抑制剂的临床应用前景。 方法：取Lewis肺癌细胞，用生理盐水调整细胞密度至1×107个/ml，取0.1ml接种于体重为18～20g的雄性C57小黑鼠前肢腋下皮下成瘤后，接种小鼠随机分为2组，每组7只：（1）对照组；（2）治疗组。治疗组于接种后第一天起腹腔注射NOS抑制剂硝基左旋精氨酸甲基酯（NG-nitro-L-arginine methyl ester，L-NAME）100μl/日（5mg/kg体重），持续14天，对照组于接种后第一天起腹腔注射0.9%的生理盐水100μl/日，持续14天。于接种后第15天切开右腹股沟静脉，采取静脉血，离心，取血清保存于-20℃冰箱中备用。处死动物，剥离肿瘤，称取质量后放入10%甲醇溶液固定，取出两肺放入10%甲醇溶液固定。以HE染色后光镜下检测微血管密度（Micro Vessel Density，MVD）；采用Envision System免疫组织化学方法检测血管内皮生长因子（Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF）；ELISA法检测血清中一氧化氮（Nitric Oxide，NO）的含量；光镜下观察肺内转移灶。 WP=4 结果：（1）对照组与治疗组瘤重分别为（2.59±0.31）g、（1.80±0.33）g，治疗组瘤重明显低于对照组（P﹤0.01）。（2）对照组与治疗组MVD分别为（24.06±5.42）、（16.97±2.86），治疗组MVD明显少于对照组（P﹤0.01）。（3）对照组与治疗组癌组织中VEGF表达无明显差异。（4）对照组与治疗组血清中NO的含量分别为（33.26±12.5322）μmol/l、（14.56±7.1356）μmol/l，治疗组血清中NO含量明显低于对照组（P﹤0.01）。（5）对照组与治疗组光镜下观察肺内转移无明显差异。 结论：（1）NOS抑制剂L-NAME可抑制内源性NO的合成。（2）L-NAME通过抑制内源性NO的合成，抑制小鼠肺癌的血管形成，进而抑制肿瘤生长。（3）L-NAME可能不是通过抑制VEGF的生成而发挥抑制血管生成作用的，而是通过另外途径产生效应。（4）血管形成抑制剂可作为新的抑瘤药物，可能在肿瘤的治疗中具有良好的应用前景。