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小鼠不同杂交组合胚胎玻璃化冷冻的研究

金花子  
【摘要】: 本文通过小鼠胚胎玻璃化冷冻的研究,确定对胚胎无毒性或毒性小的冷冻保护剂的种类、适宜浓度及适宜冷冻的胚胎发育阶段,以便达到提高胚胎冷冻存活率的目的。 1.小鼠不同杂交组合分为ICR♀×昆明♂、昆明♀×昆明♂、ICR♀×ICR♂、昆明♀×ICR♂组,受精率分别为76.0%、80.9%、72.4%及66.7%,平均排卵数为17.6、13.4、11.3及8.1枚。经统计分析,受精率在不同杂交组合之间差异不显著;超排效果ICR♀×昆明♂组显著高于ICR♀×ICR♂、昆明♀×ICR♂组(P<0.05),其它各组之间差异不显著。 2.用海藻糖和蔗糖处理的小鼠早期囊胚存活率分别为79.06%和77.07%;桑椹胚分别为46.31%和51.63%。经统计分析,小鼠早期囊胚存活率海藻糖组显著高于蔗糖组(P<0.05);桑椹胚存活率两组之间差异不显著。 3.小鼠桑椹胚和早期囊胚用0.5M海藻糖处理后存活率分别为61.84%和95.57%;用0.25M海藻糖处理后存活率分别为35.50%和67.22%。经统计分析,桑椹胚和早期囊胚在0.5M海藻糖溶液中的存活率均显著高于0.25M组(P<0.05)。 4.0.5M海藻糖溶液做基础液,分别用0.0M(对照组)、2.0M、2.5M、3.0M、及3.5M甘油处理小鼠桑椹胚和早期囊胚,桑椹胚存活率分别为57.25%、56.43%、63.68%、60.48%及70.79%;早期囊胚存活率分别为96.98%、94.77%、98.15%、92.44%及96.10%。经统计分析,对照组与不同浓度甘油组之间小鼠桑椹胚和早期囊胚的存活率均差异不显著。 5、小鼠桑椹胚和早期囊胚用2.5M甘油处理存活率分别为73.7%和98.2%。经统计分析,早期囊胚的存活率显著高于桑椹胚(P<0.05)。 6.不同冷冻方法对小鼠胚胎冷冻效果的影响实验中,缓慢冷冻法与玻璃化冷冻法之间解冻后回收正常胚数、培养12小时的囊胚存活率均差异不显著。 7.不同浓度乙二醇(EG)对小鼠胚胎冷冻效果的影响实验中,解冻回收正常胚、经培养12小时、24小时、36小时及48小时的囊胚存活率和囊胚孵化率,除对照组(不含EG)培养12小时的囊胚存活率显著高于10%EG组(P<0.05)外,对照组与10%EG和20%EG组之间均差异不显著,但对照组的解冻回收正常胚、经 小鼠不同杂交组合胚胎玻璃化冷冻的研究一中文摘要 培养12小时、24小时、36小时及48小时的囊胚存活率和囊胚孵化率均显著高 于30%EG组(P0 .05)。 8.小鼠不同杂交组合对胚胎玻璃化冷冻效果的影响实验中,昆明早x昆明 占、昆明早x工cR占、IcR早x昆明占、IcR早x工cR占组合间的解冻后正常胚胎数 差异不显著;培养12小时的囊胚发育率昆明早x工cR占组显著高于工cR早只昆明 古组(P。.05),其他组之间差异不显著;培养24小时、36小时的囊胚发育率 昆明早x昆明占、昆明早X工cR占、工cR早X工cR占组均显著高于工cR早x昆明占 组(P0 .05);昆明早x昆明占、昆明早X工cR占、IcR早X IcR古组之间差异不显 著;培养48小时的囊胚发育率和囊胚孵化率四个杂交组合之间差异不显著。


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