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珍珠梅抗肿瘤作用机制及其化学成分的研究

张学武  
【摘要】: 1.珍珠梅氯仿提取物对S_(180)荷瘤小鼠抑瘤作用机制的研究取60只小鼠复制S_(180)荷瘤模型,随机分成5组:珍珠梅氯仿提取物大、中、小剂量组,对照组,环磷酰胺组。观察珍珠梅氯仿提取物对S_(180)荷瘤小鼠的抑制率、脾指数及胸腺指数,NK细胞活性及血清肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-2(IL-2)的含量,肿瘤组织及瘤旁组织血管内皮生长因子(VEGF)、血管生成素(Ang-1)的表达。结果表明:珍珠梅氯仿提取物对S_(180)荷瘤小鼠有明显的抑瘤作用,并能显著提高S_(180)荷瘤小鼠脾指数及胸腺指数,明显升高脾细胞NK细胞活性及血清TNF-α、IL-2的含量。RT-PCR结果显示,与对照组比较,珍珠梅氯仿提取物大、中剂量组、环磷酰胺组,VEGF mRNA的表达在S_(180)荷瘤小鼠肿瘤组织和瘤旁组织均有显著性差异。免疫杂交结果显示,珍珠梅氯仿提取物可以明显降低VEGF蛋自在肿瘤组织中的表达;Ang-1蛋白的表达在各组中无显著性差异。 2.5,2′,4′-三羟基-6,7,5′-三甲氧基黄酮抑制肝癌HepG-2细胞增殖的实验研究采用MTT比色法观察到从珍珠梅中分离得到的新化合物:5,2′,4′-三羟基-6,7,5′-三甲氧基黄酮可抑制肝癌HepG-2细胞增殖,其作用具有时间和浓度依赖性;5,2′,4′-三羟基-6,7,5′-三甲氧基黄酮可诱导细胞凋亡;同时改变细胞周期分布,多数细胞阻滞于G_2/M期,与对照组比较,细胞凋亡率差异有显著性;用药前后凋亡相关基因bcl-2、bax及p53蛋白表达均有显著性改变。 3.珍珠梅化学成分的研究采用硅胶柱色谱法从珍珠梅的氯仿、乙酸乙酯提取部位进行分离纯化,通过理化常数测定、波谱分析、标准品比较和文献对照等鉴定出化合物结构。分离得到7个化合物,分别鉴定为5,2′,4′-三羟基-6,7,5′-三甲氧基黄酮(Ⅰ),5,7-二羟基-8-甲氧基黄酮(Ⅱ),芦丁(Ⅲ),槲皮素(Ⅳ),胡萝卜苷(Ⅴ),苯甲酸(Ⅵ)和对羟基苯甲酸(Ⅶ),7个化合物均为首次从珍珠梅植物中分离获得。


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