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牛皮杜鹃组织培养及生物多样性分析

宫宇  
【摘要】: 牛皮杜鹃是一种极具观赏性的高山杜鹃,主要靠种子繁殖。由于种子的自然发芽率低、繁殖速度缓慢,加之人们对其生长环境的严重破坏,使得牛皮杜鹃已经到了达濒危物种的程度。本研究利用组织培养的方法对其进行离体培养,可以使濒危的牛皮杜鹃得到延续和发展,有着十分重要的意义。另外,本研究还从解剖学和分子水平上分析了海拔高度对细胞形态、结构方面和遗传多样性方面的影响,为进一步保护和开发牛皮杜鹃提供理论依据。 通过对牛皮杜鹃组织培养的研究得出:最佳诱导培养基为WPM+8 mg/L ZT+3 mg/L IBA,pH=5.2,附加白糖20g/L;最佳生根壮苗培养基为(?)VPM+0.4 mg/L IBA+0.1 mg/L NAA+ 1g/LAC;最佳移栽基质为苔藓土,移栽成活率达94%。 通过对牛皮杜鹃叶片解剖结果上的研究,结果表明:利用光学显微镜对长白山海拔2570 m、2381m、1982 m、1788 m和敦化老白山1695 m不同高度生长的牛皮杜鹃叶片横切面的观察。观察结果为随着海拔高度的增加叶片外部形态有逐渐减小的趋势,叶片内部结构中叶片主脉直径、栅栏组织厚度、上表皮厚度等有逐渐增加的趋势。 通过RAPD技术对牛皮杜鹃多样性的初步研究表明:适合牛皮杜鹃的RAPD反应优化体系为:20μL PCR反应总体积中含模板DNA10 ng,Mg2+1.5mmol/L,引物15 pmol/μL, dNTP 0.15 mmol/L, Taq DNA聚合酶1.0U。另外,对5个不同海拔的群体进行了遗传多样性分析表明,在遗传相似系数为0.80处时,5个牛皮杜鹃群体可以分为两大类,第一类为吉林长白山,第二类为吉林老白山,初步了解了牛皮杜鹃不同群体之间的亲缘关系的远近。


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