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热激蛋白70生物探针的制备与应用

李忠和  
【摘要】: 热激蛋白(Heat Shock Proteins,HSPs)在各类生物体内普遍存在。其中热激蛋白70(HSP70)最为重要,在生物体受到环境胁迫,如热胁迫、有机污染胁迫、重金属污染胁迫等时会大量表达,对污染物具有早期预警作用,是反映环境污染程度的有效生物学标志物。本论文以鲤鱼为实验材料,采用组织破碎、盐析、层析、电泳等技术方法对鱼热激蛋白70进行了分离纯化,最终获得纯品,进而以鱼体热激蛋白70为靶标,通过噬菌体表面展示十二肽库,经三轮筛选获得一个鱼HSP70特异性亲和配体序列,之后再采用人工合成肽的方法制成生物探针。在受试生物鲤鱼受无机重金属Cu~(2+)胁迫的条件下,采用制得的生物探针对鲤鱼血清HSP70的表达水平进行检测,最终建立一种新型快速检测水体质量的方法,为环境监测与环境管理服务。


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