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东北地区蜱传病原多样性调查以及检测方法的建立

杨志红  
【摘要】:蜱是一种媒介生物,可以携带一些病原进行传播。 本实验采用聚合酶链式反应(PCR)通过对2009年以及2010年从黑龙江的绥芬河,密山,东宁,虎林,逊克,黑河等地以及内蒙古草原和辽宁朝阳地区采集的蜱虫携带的多种病原体进行检测,发现立克次体、伯氏疏螺旋体、Q热立克次体和巴通体的存在,通过测序分型,伯氏疏螺旋体基因型为B.g,立克次体为斑点热立克次体和斑点伤寒立克次体。 09年的黑龙江共96份样本,全沟硬蜱中检测出伯氏疏螺旋体4例阳性,阳性百分比为4.17%; Q热立克次体18例阳性,阳性百分比的18.75%;立克次体34例阳性,阳性百分比为35.42%,其中斑点热立克次体17例包括西伯利亚立克次体检测到的8例阳性,斑疹伤寒立克次体也检测到17例,全沟硬蜱和森林革蜱都有发现,地区除了东宁外都发现其携带;2010年的黑龙江共全沟硬蜱81只,森林革蜱52只和20只血蜱。PCR检测发现携带3例伯氏疏螺旋体,阳性百分比为1.96%;15例Q热立克次体,阳性百分比为9.8%;23例立克次体,阳性百分比为15.03%,其中斑点热立克次体19例,斑疹伤寒立克次体4例;1例巴通体阳性,百分比为0.65%;内蒙古60份亚东璃眼蜱,经检测,发现5例伯氏疏螺旋体,阳性百分比为8.33%;16例Q热立克次体以及2例西伯利亚立克次体,阳性百分比分别为26.67%和3.33%;辽宁朝阳98个样本,发现了2例伯氏疏螺旋体和9例Q热立克次体,阳性百分比分别为2.04%,9.18%;伯氏疏螺旋体及立克次体类携带比较广泛,10年的蜱种发现了巴通体,虽然只有一例,但是巴通体在我国发现感染的不多,更应该加强贸易往来间的安检,以防从国外传来新的病原物种。Q热立克次体在东北地区首次发现大规模的感染情况,因此要尽可能的排除假阳性的出现,对阳性结果进行southern杂交验证。Southern杂交结果表明蜱虫携带大量Q热立克次体,又一次拉响了警报。 建立的荧光定量PCR方法具有良好的灵敏性,较高的特异性,灵敏度为37拷贝/μL,特异性验证的r值为0.997,因此具备实用性。 本实验通过对病原多样性的监测调查以及方法的建立,为我国边境地区公共卫生安全做出贡献,掌握病原的多样性,可以为预防做准备,对于保护人类生命财产安全具备重要的意义。


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