收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

异硫氰酸荧光素标记真菌多糖的研究

吴宗翰  
【摘要】:本实验以小刺猴头菌和黑木耳液体深层发酵浸膏为原料通过水提和碱提两种提取方法进行粗多糖的提取并除蛋白,并进行粗多糖中各种糖含量的测定。通过利用提取多糖的还原性末端,进行还原胺化反应,生成多糖-酪胺结合物,然后在碱性条件下与异硫氰酸荧光素(FITC)的硫氰基共价生成硫碳氨基键,从而实现多糖的荧光标记。研究实验结果如下: 通过苯酚-硫酸法测定多糖的糖含量,Sevag法测定蛋白质含量,硫酸-吡啶法测定糖醛酸的含量,Morgen法测定氨基糖的含量。测定结果发现,提取的小刺猴头菌多糖和黑木耳多糖中糖含量丰富,而且还原糖含量也较多,也存在一定量的氨基糖,黑木耳多糖的糖醛酸含量大于小刺猴头菌多糖,说明黑木耳多糖的酸性比小刺猴头菌多糖强。根据本实验室的研究,糖醛酸含量多的多糖其生物学活性相对于糖醛酸含量少的多糖小的多。 标记物光谱分析结果表明:两种真菌多糖均可以和FITC在胺化后进行亲核加成,达到荧光标记的目的,而且FITC的取代度实验表明,两种标记多糖的取代度均满足测试条件而且不影响多糖的总体结构,其生物活性没有改变。 通过对两种标记的真菌多糖进行生物活性测试,结果表明:标记后的小刺猴头菌多糖和黑木耳多糖在体外的PBS溶液,小鼠血液,尿液中的稳定性良好,荧光强度在24h内强度稳定。 体内实验初探结果表明:在用两种标记后的多糖进行了口服灌胃后,可以在小鼠的血液,尿液,粪便和肠溶物中均可以检测到荧光信号,而且在12小时内荧光强度的变化符合小鼠消化系统的变化。通过荧光活体检测技术,可以观察到,在灌胃2h内,荧光信号主要集中在小鼠消化系统内。 MTT细胞毒性检测说明,标记后的多糖对人结肠癌sw1116细胞的毒性并不受荧光标记的影响。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 耿敬章;杨大鹏;;真菌多糖的生物活性及其应用研究[J];饮料工业;2007年07期
2 白岚;;真菌多糖的研究进展——真菌多糖的结构、提纯和应用[J];河北林果研究;2009年04期
3 王海涛;赵雪娇;石洺瑀;高季瑜;;真菌多糖的研究进展与开发前景[J];黑龙江科技信息;2010年16期
4 冯焱;真菌多糖免疫调节机能的研究进展[J];畜牧兽医科技信息;2003年05期
5 熊中良;邓春生;;真菌多糖免疫活性的研究进展[J];江西农业学报;2006年02期
6 黄绍重;李伟华;;食(药)用真菌多糖及其生理功能[J];商丘职业技术学院学报;2007年02期
7 赵春海;阚振荣;;食(药)用真菌多糖的研究[J];发酵科技通讯;2008年02期
8 王舒宁;;真菌多糖免疫调节作用的研究进展[J];福建畜牧兽医;2009年03期
9 吕金超;宋慧;苏玲;刘小腊;王雪;;4种真菌粗多糖体外抗肿瘤作用研究[J];安徽农业科学;2010年13期
10 邢效瑞;崔京春;郭海勇;钱爱东;;真菌多糖免疫调节作用研究进展[J];黑龙江畜牧兽医;2012年19期
11 郭天力;严晓娟;胡先望;梁宁;陈朋;;真菌多糖研究进展[J];现代生物医学进展;2013年18期
12 李小定,荣建华,吴谋成;真菌多糖生物活性研究进展[J];食用菌学报;2002年04期
13 葛青;张安强;孙培龙;;真菌多糖结构修饰及鉴定研究进展[J];中国食用菌;2008年01期
14 杨颜铭;宋慧;张中北;王丽娜;吴波;邢亚丽;;真菌多糖与花生凝集素的相互作用[J];菌物研究;2013年02期
15 吴新君,毛培宏,金湘,曾宪贤;食(药)用真菌多糖的研究[J];食用菌;2004年04期
16 李艳辉,王琦;真菌多糖的生物活性与构效关系研究评介[J];吉林农业大学学报;2002年02期
17 叶龙祥;刘清斌;;真菌多糖的研究进展[J];农产品加工(学刊);2007年05期
18 赵艳霞;缪康杰;魏志文;张梅梅;郑维发;;真菌多糖激发子对桦褐孔菌多酚积累影响的研究[J];中草药;2010年12期
19 王思芦;汪开毓;陈德芳;;食用真菌多糖免疫调节作用及其机制研究进展[J];动物医学进展;2012年11期
20 肖建辉,蒋侬辉,梁宗琦,刘爱英;虫草类真菌多糖的研究及应用前景[J];山地农业生物学报;2003年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 孙培龙;张坚;杨开;;真菌多糖的功能研究进展[A];首届长三角科技论坛——营养与保健食品发展分论坛论文集[C];2004年
2 刘玉红;王凤山;;真菌多糖结构研究进展[A];山东省药学会2006年生化与生物技术药物学术研讨会论文集[C];2006年
3 张新亮;黄志坚;;真菌液体发酵与真菌多糖的研究进展[A];福建省畜牧兽医学会2009年学术年会论文集[C];2009年
4 许春平;耿卢婧;何培新;王吉中;;真菌多糖的发酵优化,分子表征,生物活性及其在烟草中的应用[A];中国菌物学会第五届会员代表大会暨2011年学术年会论文摘要集[C];2011年
5 刘玉红;王凤山;;真菌多糖结构研究进展[A];山东省药学会第一届学术年会论文集(下)[C];2005年
6 章荣华;傅剑云;徐彩菊;毛光明;陈玉满;郑云燕;;复合真菌多糖抗肿瘤作用研究[A];2000全国肿瘤学术大会论文集[C];2000年
7 杨铭真;;真菌多糖的抗肿瘤作用与开发探讨[A];全国第6届食用菌学术研讨会论文集[C];2001年
8 索菲娅;姜彦成;;已开发利用的食(药)真菌多糖[A];中国第六届海峡两岸菌物学学术研讨会论文集[C];2004年
9 朱国振;闫培生;;利用稻瘟霉模型筛选抗肿瘤真菌多糖的初步研究[A];2007医学前沿论坛暨第十届全国肿瘤药理与化疗学术会议论文集[C];2007年
10 胡国华;马正智;吴彬;;米糠多糖的保健功能[A];第三届全国粳稻米产业大会专集[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 孙永旭;白树花菌丝体多糖的分离纯化、结构及其免疫活性研究[D];东北师范大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 柏婷婷;真菌多糖掺假检测方法的研究[D];扬州大学;2008年
2 王再林;几种真菌多糖荧光标记的研究[D];吉林农业大学;2012年
3 李红权;真菌多糖对虾类免疫功能的影响[D];河北大学;2001年
4 牛小义;新型生物杀菌剂真菌多糖在烟草病害防治中的研究和应用[D];西北农林科技大学;2013年
5 张中北;罗丹明B标记几种真菌多糖的研究[D];吉林农业大学;2011年
6 吴宗翰;异硫氰酸荧光素标记真菌多糖的研究[D];吉林农业大学;2013年
7 张惠杰;不同搅拌方式对发酵生产真菌多糖构效关系的影响[D];河南工业大学;2014年
8 邢占厂;茶树菇多糖作为烟草保润剂的研究[D];云南大学;2014年
9 闫梅霞;药用菌液体培养和多糖活性研究[D];中国农业科学院;2008年
10 李佳媚;两种真菌多糖的体外生物活性研究[D];陕西师范大学;2013年
中国重要报纸全文数据库 前7条
1 本报记者 杨玲玲;探究真菌多糖的活性基团[N];中国医药报;2013年
2 彭会安;美罗国际 高擎真菌多糖生物科技创新发展大旗[N];中国高新技术产业导报;2007年
3 王淑兰 王珂;真菌多糖的生理活性[N];中国食品质量报;2003年
4 本报记者 滕继濮;找到真菌多糖中的活性基团[N];科技日报;2010年
5 南开大学药学院 白钢;功能发酵制品产业发展趋势分析[N];中国食品报;2010年
6 蒋家騉;儿童常吃食用菌有益健康[N];家庭医生报;2007年
7 彭会安;引领多糖时代潮[N];中国高新技术产业导报;2005年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978