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根特异性启动子表达AAP1-Bar双价基因在玉米新材料创制中的应用研究

佟珊珊  
【摘要】:高蛋白玉米,是指玉米蛋白质成分中富含赖氨酸的特殊玉米类型,又称为高赖氨酸玉米,它不仅可以作为优质的畜禽饲料,在食品加工方面也有很大的优势,随着人们生活水平的提高,人们的食品消费也在向着富于营养,有益健康的方向发展,而有关资料表明食用高蛋白玉米,可以有效防止“癞皮病”的发生,而从拟南芥中分离出来的氨基酸通透酶1(AAP1)基因,它在拟南芥的主根、侧根、根毛、根表皮细胞中广泛存在,并且均有增加氨基酸含量的作用。本研究旨在利用根的组织特异性使AAP1基因在根中特异性表达,进而在“源”的层面上增加玉米氨基酸含量,Bar基因作为筛选基因,获得高蛋白抗除草剂的玉米新材料。 本研究克隆了拟南芥AAP1基因,并通过原核表达和真核表达对该基因的功能进行了初步分析,主要有以下结果: 1、通过cDNA法克隆出了拟南芥AAP1基因,并通过生物信息学的分析,了解AtAAP1基因的蛋白大约为52kD,不含有信号肽,无跨膜区等基本信息。 2、通过设计的带有酶切位点的引物进行克隆,并与原核表达载体pET-32a(+)连接,构建原核表达载体,命名为pET-32a-AAP1,并通过SDS-PAGE电泳,获得了与预期片段大小相符的蛋白片段。 3、通过设计的带有酶切位点的引物进行克隆,并将目的基因与根特异性启动子RolD以及带有Bar基因的植物表达载体PTF10.1连接,构建真核植物表达载体,命名为PTF101.1-RolD-AAP1。 4、将构建好的植物表达载体通过三亲杂交的方式转到农杆菌中,并通过花序顶端侵染的方式转入拟南芥中,经过Basta抗性筛选,并获得T1代种子,将T1代种子继续播种后通过测定根、茎、叶中氨基酸含量,并与普通拟南芥中各部位的含量相比较,确定AAP1基因对氨基酸的作用。 5、将三亲杂交后的目的基因分别通过芽尖转化法及基因枪轰击的方法,转入到玉米B73中,其中芽尖转化法已经初步获得两株经过抗性筛选及PCR检测的阳性幼苗;基因枪轰击法获得了抗性胚,在进一步的抗性筛选中。


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8 DOUGLAS M;韩俊;;玉米[J];海南大学学报(自然科学版);1989年01期
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15 陈清硕;;玉米红苗现象的研究[J];植物生理学通讯;1982年03期
16 汪晓原;;玉米生态气候研究进展[J];中国农业气象;1991年03期
17 范文仲;玉米地膜覆盖栽培效果及关键技术[J];内江科技;1998年02期
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3 佟屏亚;;论中国发展玉米生产的科技导向[A];全面建设小康社会——中国科协二○○三年学术年会农林水论文精选[C];2003年
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5 黄辉;;玉米生产、市场与技术发展情况的思考[A];第五届中国农业推广研究征文集[C];2006年
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10 戴景瑞;王守才;谢友菊;王国英;杨会;张荣;;玉米基因工程与抗虫玉米育种[A];21世纪作物科技与生产发展学术讨论会论文集[C];2002年
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1 东华期货研发部 陶金峰;利空为玉米期市热情泼凉水[N];证券时报;2006年
2 闻有成;玉米仍是东北来钱产业[N];经济参考报;2003年
3 张子臣 赵志强;把玉米产业当做“王牌”来打[N];经济日报;2003年
4 任凭;玉米仍是东北的经济发展优势[N];粮油市场报;2003年
5 ;专用玉米优势区域发展规划[N];农民日报;2003年
6 梅立红;利好释放——国内玉米市场涨势暂时告一段落[N];粮油市场报;2006年
7 苏振军;玉米南北均看好 空间多少需思量[N];期货日报;2006年
8 陶金峰;上涨行情依然值得期待[N];期货日报;2006年
9 王运涛;玉米仍处弱势之中[N];期货日报;2006年
10 曹彦辉;玉米市场蕴藏套利机会[N];期货日报;2007年
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