收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

Shadoo蛋白对老龄化小鼠影响的研究

王欣宇  
【摘要】:Shadoo蛋白是朊蛋白家族中的第三个蛋白,通过基因组学方法筛选出的一种与朊蛋白相似的蛋白,其编码基因为Sprn,Shadoo蛋白与朊蛋白的表达位置基本一致,并具有与朊蛋白类似的神经保护功能。已有研究表明朊蛋白具有神经保护和抗氧化作用,并参与到生理衰老的过程中,而Shadoo蛋白与朊蛋白有很多相似之处,被认为是正常的朊蛋白PrPC向异常的朊病毒PrPSc转变的过程中的一个特殊因子,Shadoo蛋白缺失会导致记忆认知和兴奋性降低,因此我们认为Shadoo蛋白可能对生理衰老起到一定的调控作用。本课题研究以Shadoo基因敲除老年鼠为模型,研究Shadoo蛋白对老龄化小鼠的调节作用。首先构建Sprn基因敲除小鼠品系,通过PCR筛选鉴定Sprn基因敲除双染色体纯合小鼠,并将其养至18月龄(小鼠老龄年龄)。1.通过神经行为学实验(Morris水迷宫,自主活动,避暗实验,跳台实验,)测试Shadoo基因敲除老年鼠学习记忆能力和运动能力的变化,结果显示,水迷宫定位航行试验中,Sprn-/-鼠在前六天的逃避潜伏期均比野生型鼠要短,在第三天,第四天以及第六天,差异显著(P0.05),其余几天差异不显著;空间探索实验中,Sprn-/-鼠穿越虚拟平台的次数比野生鼠要少两次左右,并且在首次穿越平台的时间较野生鼠多出40s,野生型鼠空间探索轨迹具有比较明显的趋向性,Sprn-/-鼠则具有随意性;自主活动实验中,Sprn-/-鼠的活动次数比野生型小鼠的要少,Sprn-/-鼠的活动次数在第一天与野生型鼠相近,其余三天活动次数均比野生型鼠显著减少,并且差异显著(P0.01);避暗试验中第一天Sprn-/-鼠5min内的电击次数多于野生鼠,第二天和第三天均少于野生型鼠,但差异不明显(P0.05);在跳台试验,Sprn-/-鼠和野生鼠的跳台次数在统计学上没有显著差异,但Sprn-/-的次数都比野生鼠要少,Sprn-/-鼠表现出的学习记忆能力不如野生鼠。这些神经行为学实验反映Shadoo蛋白的缺失对老年鼠学习记忆能力有一定损伤,小鼠的中枢神经兴奋状态受到了抑制,运动能力显著下降。2.采用Golgi染色方法观察统计Sprn基因敲除老年鼠海马区和大脑皮层神经元密度,结果显示Sprn-/-老年鼠新皮质分子层较野生鼠更薄,分子层神经胶质细胞减少。Sprn-/-老年鼠海马区域和大脑皮层的神经元密度均小于野生型老年鼠。利用HE染色观察两种鼠的小脑,海马,大脑皮质,Sprn-/-老年鼠大脑皮质的小椎体细胞明显少于野生鼠,差异显著(P0.05)小脑外颗粒层较野生鼠变薄,两种鼠的浦肯野氏细胞层都变得杂乱。3.采取RT-PCR、免疫组化和Western blot方法验证与脑老化相关的基因、蛋白表达情况。免疫组化,Western blot结果显示相对于野生老年鼠,Sprn-/-老年鼠脑内GFAP蛋白表达量减少;RT-PCR结果表明:Sprn-/-老年鼠与野生型鼠相比,脑中海马部位GFAP和Ras-GRF1 mRNA分布量降低。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 徐国恒;朊蛋白复制与疯牛病的传播[J];生物学通报;2004年04期
2 何炜;李向臣;;疯牛病与朊蛋白的研究进展[J];安徽农业科学;2007年25期
3 陈建华,吴润,刘湘涛,陈豪泰;牛朊蛋白单氨基酸变异体的原核表达[J];中国兽医科技;2005年04期
4 潘传英;于姣;蓝贤勇;陈宏;;朊蛋白在物种内、物种间的致病机理[J];黄牛杂志;2005年05期
5 朱小玲;刘永生;张杰;吴润;陈豪泰;姜海霞;路伟;谢庆阁;;秦川黄牛成熟朊蛋白单克隆抗体的制备及鉴定[J];中国人兽共患病学报;2006年09期
6 郝永新;杨建民;赵德明;秦秀慧;马李颖;;朊蛋白抗体研究与应用[J];中国兽医杂志;2006年10期
7 张太翔;赵德明;;朊蛋白构象改变和种属突破机制的研究进展[J];中国畜牧兽医;2006年11期
8 宁章勇;赵德明;杨建民;周向梅;于博;孔小明;尹晓敏;;处理重组牛朊蛋白对接种金黄地鼠脑组织朊蛋白的效应[J];中国动物检疫;2006年12期
9 路伟;张鹏;张杰;刘永生;卫广森;陈豪泰;姜海霞;朱小玲;;牛朊蛋白27-30基因的克隆与表达[J];中国预防兽医学报;2007年04期
10 王新;吴佳宁;李海鹏;刘贺;姚鹏杰;刘虹;吴洪涛;刘欣;赵玉军;;细胞内朊蛋白神经保护性功能[J];现代畜牧兽医;2008年04期
11 杜芬;梅芳华;肖庚富;梁毅;;牛朊蛋白理化性质分析及其多克隆抗体的制备[J];武汉大学学报(医学版);2009年05期
12 王雄;万家余;李吉平;徐静;吴松波;高宏伟;;利用表面等离子共振技术检测牛奶中的朊蛋白[J];吉林农业大学学报;2010年04期
13 谭荣荣;刘爱林;赵德明;;朊蛋白生理功能的研究进展[J];中国畜牧兽医;2011年01期
14 伍志伟,吴润,刘湘涛,陈豪泰;原核表达牦牛朊蛋白的纯化及其活性测定[J];甘肃农业大学学报;2005年02期
15 兰邹然;王志亮;张学成;;与朊毒体相关的鱼类朊蛋白研究概况[J];动物学杂志;2006年04期
16 宁章勇;于博;邓衔柏;李玉谷;马勇江;孔小明;;食蟹猴和猕猴朊蛋白基因的克隆与序列分析[J];中国兽医科学;2008年04期
17 管峰;石国庆;赵进;杨利国;;乳及乳制品中朊蛋白及其安全性研究进展[J];动物营养学报;2010年05期
18 王东旭;万家余;李忠义;孟珂音;高宏伟;;PrP蛋白与Shadoo蛋白研究进展[J];中国畜牧兽医;2011年06期
19 李炎鑫;马贵平;杨汉春;刘全国;史喜菊;李冰玲;;牛朊蛋白和酵母朊毒体结构域融合蛋白的原核表达及其单克隆抗体的制备[J];畜牧兽医学报;2012年01期
20 张鑫鑫;刘雨田;吴晓东;刘焕奇;王志亮;;麋鹿重组朊蛋白单克隆抗体的制备及初步鉴定[J];中国畜牧兽医;2012年06期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 苑方重;张珠明;赵德明;;金属离子与朊蛋白疾病[A];中国畜牧兽医学会2010年学术年会——第二届中国兽医临床大会论文集(上册)[C];2010年
2 管峰;石国庆;杨利国;;乳中朊蛋白及安全性研究进展[A];中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十五届学术研讨会论文集(下册)[C];2010年
3 陶利明;王志亮;;朊蛋白基因结构与功能研究进展[A];中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会论文集[C];2005年
4 宁章勇;赵德明;;朊蛋白基因在金黄地鼠脑和外周组织的动态表达定量[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十三次学术讨论会和中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十二次学术讨论会论文集[C];2005年
5 宁章勇;赵德明;于博;孔小明;;处理重组牛朊蛋白对接种金黄地鼠脑组织朊蛋白的效应[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十四次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十三次学术研讨会论文集[C];2006年
6 张珠明;赵德明;;朊蛋白基因多态性与动物传染性海绵状脑病[A];中国微生物学会微生物资源专业委员会成立大会暨第一届学术研讨会论文摘要集[C];2009年
7 俞国华;陈建泉;俞慧清;刘思国;张爱民;陈娟;徐旭俊;沙红英;吴友兵;张绪峰;吴国祥;徐少甫;成国祥;;通过体细胞基因打靶制备朊蛋白基因敲除山羊[A];中国生物工程学会2006年学术年会暨全国生物反应器学术研讨会论文摘要集[C];2006年
8 杨秀进;杨利峰;赵德明;;牛、羊、人等六种朊蛋白的全真表达、纯化及复性方法的研究[A];第四届全国微生物资源学术暨国家微生物资源平台运行服务研讨会论文集[C];2012年
9 赵德明;;动物传染性海绵状脑病研究进展[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十三次学术讨论会和中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十二次学术讨论会论文集[C];2005年
10 陈豪泰;张杰;刘永生;吴润;;羊与麝朊蛋白基因的序列差异[A];中国畜牧兽医学会2006学术年会论文集(上册)[C];2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 宁璐璐;朊蛋白错误折叠和聚集机制的分子动力学模拟研究[D];兰州大学;2015年
2 宫彬彬;N-端23-30位氨基酸对朊蛋白胞吞、抗氧化功能及繁殖影响的研究[D];吉林大学;2011年
3 宁章勇;朊蛋白基因表达与传染性海绵状脑病发生发展关系的研究[D];中国农业大学;2005年
4 张吉斌;抗—牛朊蛋白单链抗体检测系统的构建、表征与应用[D];华中农业大学;2006年
5 张杰;哺乳动物朊蛋白与叠朊的原核表达及牛朊蛋白单抗制备[D];中国农业科学院;2006年
6 周拯;大分子拥挤环境中朊蛋白错误折叠机制研究[D];武汉大学;2009年
7 胡萍萍;基于朊蛋白—核酸适配子相互作用的朊蛋白定量生物学研究[D];西南大学;2014年
8 吴润;偶蹄动物朊蛋白基因结构特征及其重组蛋白抗原性的研究[D];甘肃农业大学;2004年
9 刁小龙;鸡朊蛋白参与DF-1细胞增殖粘附的功能研究[D];甘肃农业大学;2013年
10 梅芳华;牛、鼠、兔朊蛋白理化性质比较及朊蛋白的互作蛋白KCTD1的分析[D];武汉大学;2014年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 施冲旭;PRRSV的分离鉴定及其对Marc-145细胞型朊蛋白表达影响的研究[D];中国农业科学院;2015年
2 张宝红;过氧钒配合物抑制朊蛋白淀粉样肽的纤维形成[D];中北大学;2016年
3 巩昌国;内源性朊蛋白在结肠炎相关性结肠癌中的作用的研究[D];华东师范大学;2016年
4 于超;N端突变的小鼠朊蛋白构建和表达及突变体蛋白对朊蛋白构象转变的影响[D];华东师范大学;2016年
5 王欣宇;Shadoo蛋白对老龄化小鼠影响的研究[D];吉林农业大学;2016年
6 南昊;AcMNPV LEF-10朊蛋白聚集特性的研究[D];西北农林科技大学;2016年
7 罗鹏;鸡朊蛋白的抗血清制备及其在神经系统中的分布[D];甘肃农业大学;2012年
8 王朝霞;限制性酶改性小麦谷朊蛋白乳化作用及乳化机理研究[D];齐鲁工业大学;2014年
9 孙红玉;α-聚赖氨酸提高谷朊蛋白酶促交联及其膜材料性能的研究[D];江南大学;2015年
10 陈建华;牛朊蛋白3个单氨基酸变异体的原核表达及其包涵体蛋白的变性与复性[D];甘肃农业大学;2005年
中国重要报纸全文数据库 前3条
1 通讯员 刘克元 特约记者 徐雅金;重组朊蛋白可抑制“疯牛病”传播[N];健康报;2013年
2 ;美国“新牛”不染疯牛病[N];天津日报;2007年
3 本文由香港麦迪信医学出版有限公司供稿;“垃圾处理”系统失灵[N];医药经济报;2002年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978