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芽孢杆菌的筛选鉴定及对鲤鱼免疫和消化功能影响

王建超  
【摘要】:本试验从水产养殖基地养殖池及鲤鱼肠道和成品微生态制剂中成功分离出15株芽孢杆菌并对其进行筛选及鉴定,共筛选出三株产酶量高、酶活力强、有抑菌作用的芽孢杆菌(分别命名为SYB1-1、RYB1-8和BYB2-5),经过鉴定为枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌。将筛选出的三株芽孢杆菌与基础饲料混合,配制出四种含不同芽孢杆菌组合的日粮:基础日粮(对照组)、添加枯草芽孢杆菌的基础日粮(试验组I)、添加枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌的基础日粮(试验组II)和添加枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌(试验组III)。240尾鲤鱼随机分为四组,分别投喂四种日粮,共饲养45天。旨在探讨不同组合芽孢杆菌对鲤鱼免疫功能、抗氧化能力及肠道黏膜的影响。结果如下:(1)成功筛选三株酶活力较高的芽孢杆菌(分别命名为SYB1-1、RYB1-8和BYB2-5):SYB1-1株蛋白酶、淀粉酶和纤维素酶活力分别为32.14U、39.15U和17.68U;RYB1-8株蛋白酶、淀粉酶和纤维素酶酶活力分别为27.69U、28.25U和15.56U;BYB2-5株蛋白酶、淀粉酶和纤维素酶酶活力分别为22.80U、25.10U和14.67U。筛选的芽孢杆菌中有4株对嗜水气单胞菌具有抑菌作用,其中SYB1-1株、RYB1-8株和BYB2-5株与其他菌株相比抑菌效果较好,其抑菌圈/菌圈直径比分别为1.2、1.09和1.15;对金黄色葡萄球菌抑菌作用效果较好的菌株有12株,其中SYB1-1株、RYB1-8株和BYB2-5株抑菌作用相对较强,其抑菌圈/菌圈直径比分别为2.52、2.34和2.24。将筛选出的三株芽孢杆菌,结合细菌形态特征、生理生化特性及16S r DNA测序进行鉴定,结果显示SYB1-1株、RYB1-8株和BYB2-5株分别为枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌。(2)与对照组相比,试验组II鲤鱼白细胞吞噬百分比显著提高20.2%(P0.05),而白细胞吞噬指数显著提高41.5%(P0.05),血清中免疫球蛋白M(Ig M)显著提高26.1%(P0.05),血清中溶菌酶活性显著提高21.9%(P0.05),肠黏膜分泌型免疫球蛋白A(SIg A)含量显著提高53%(P0.05),淋巴细胞转化率显著提高32%(P0.05);试验组I鲤鱼肠黏膜免疫球蛋白A(SIg A)含量比对照组显著提高92%(P0.05)。(3)与对照组相比,试验组II鲤鱼的肝胰脏中总超氧化物岐化酶(T-SOD)活力显著提高69.4%(P0.05),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活力显著提高25.4%(P0.05),过氧化氢酶(CAT)活力显著提高76.4%(P0.05),总抗氧化能力(T-AOC)显著提高69.4%(P0.05),丙二醛(MDA)含量显著降低28.9%(P0.05),谷胱甘肽(GSH)含量提高显著达35.6%(P0.05)。(4)与对照组相比,试验组II的肠道黏膜皱襞高度显著提高25.13%(P0.05),肠黏膜层厚度显著提高11.83%(P0.05),肠道微绒毛高度显著提高43.48%(P0.05)。以上研究结果表明三株芽孢杆菌成功分离及鉴定,且饲粮中添加不同芽孢杆菌组合对鲤鱼的免疫性能、抗氧化能力及肠道黏膜方面具有一定的增强作用,其中枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌组合作用效果更为显著。


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