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吉林白鹅肉用品系主要产肉性能的ISSR分子标记研究

孙永峰  
【摘要】:本实验测定了吉林白鹅肉用品系70日龄鹅产肉性能,并应用ISSR标记技术,探索其在动物育种中的应用,研究其与肉用性状相关的分子标记,结果如下: 1、吉林白鹅肉用品系70日龄的屠宰率为84%,半净膛率为90.0%,全净膛率为80.2%。 2、用筛选出来的4种ISSR引物,对30只样本个体基因组DNA进行了ISSR扩增分析,得到962条扩增带,标记带为302条,特异带比率为31.4%。扩增的DNA片段分布在24个个体的基因组中,研究发现AK89、AK91、AK92、AK93四条引物均可用于鹅肉用性状的标记研究。 3、在屠体重性状分析中,确定了优势组合型有引物AK89的ABG、BG组合型,引物AK91的C型、AB、GHJK组合型,引物AK92的A型,引物AK93的A型、D型。确定了优势条带为引物AK89的A、B带,引物AK91的B、G带,引物AK92的G、H带,引物AK93的A带,最优势条带为引物AK91的B、G带,引物AK92的G带。 4、在全净膛重性状分析中,确定优势组合型有引物AK89的ABG、BG、GH和BGI组合型,引物AK91的C、AB、GHJK组合型,引物AK92的A、AEGH组合型,引物AK93的DI组合型。优势条带有引物AK89的A、B带,引物AK91的B、G、I带,引物AK92的A、E、H带,引物AK93的A、I带。最优势条带为引物AK89的A带,引物AK91的B带,引物AK92的A带,引物AK93的A带。 5、利用SAS System软件对吉林白鹅肉用品系基因组DNA ISSR扩增产物进行多态标记的方差分析,结果表明AK89-A、AK89-H、AK91-B、AK91-G、AK91-F、AK92-G、多态标记带与屠体重性状有显著相关;AK89-A、AK89-I、AK91-B、AK91-H、AK93-A、AK93-D多态标记带与全净膛重性状有显著相关,可利用以上各条带作为吉林白鹅肉用品系肉用性状标记位点研究。 6、确定优化的ISSR-PCR反应体系为10×缓冲液2.5μl,20mM Mg~(2+)2.0μl,5mMdNTP2.0μl,20μM Primer2.0μl,100ng/μl Template 2.0μl,2U/μl TaqDNApolymerase 0.5μl,ddH_2O14μl,反应总体积25μl。优化反应程序为94℃预变性4min;94℃变性30sec,52℃退火30sec,72℃延伸2min,循环30次;最后72℃延伸7min。反应结束保存在4℃。


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