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长春地区蝴蝶兰根腐病病原菌鉴定及化学防治效果研究

周亚丽  
【摘要】: 针对近年来长春地区蝴蝶兰根腐病普遍发生并逐年加重的现状,本文以蝴蝶兰根腐病为研究对象,进行致病病原菌的分离、鉴定、生物学特性研究以及化学防治等试验。为明确蝴蝶兰根腐病致病病原菌的种类,作者于2004-2006年从长春市及周边地区共采集317个病组织、分离240个菌株。从蝴蝶兰根部及茎基部分离到6类病原分离物。经过对其培养性状、形态观察及其接种鉴定表明,这几种分离物分别为腐皮镰刀菌(Fusarium solani)、尖孢镰刀菌(F.oxysporum)、禾谷镰刀菌(F.graminearum)、立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)、腐霉菌(Pythium sp.)和一些细菌。柯赫氏法则鉴定结果表明,腐皮镰刀菌是引致长春地区蝴蝶兰根腐病的致病菌,而其它病菌可能加重该病的发生。 本文对优势菌腐皮镰刀菌进行了生物学特性研究。结果表明,腐皮镰刀菌菌丝生长的温度范围在10℃~35℃,孢子萌发的温度范围为5~40℃。菌丝生长及产孢的最适温度均为25℃;孢子萌发最适温度为30℃,24h萌发率高达93.5%。在12h光暗交替条件下菌落生长最好,孢子萌发率也最高,16h暗8h光照条件下菌落直径最小;连续黑暗条件下产孢量最大为9.8×10~6个/ml,连续光照条件下产孢量最小为4.2×10~6个/ml。 酸碱度对腐皮镰刀菌菌落直径影响不明显;在pH值3.0~11.0之间均能萌发,而以pH值4.0~7.0萌发率最高;pH=7.11时腐皮镰刀菌产孢量最大为13.152×10~6个/ml。 菌落生长最佳碳源是果糖,5天后菌落直径为6.37 cm;在2%的琼脂糖和淀粉中腐皮镰刀菌的分生孢子萌发率较高,分别为59.7%和57.21%,而在2%的果糖中腐皮镰刀菌的分生孢子萌发率最低为1.44%;在麦芽糖中产孢量最大为12.24×10~6个/ml,琼脂糖既不利于菌落生长又不利于产孢。 在不同氮源中,NH_4NO_3利于菌落生长,5天后菌落直径为6.67cm;在CK中腐皮镰刀菌的分生孢子萌发率最高为82.1%,而在FeNH_4(SO_4)_2中病原菌分生孢子萌发率最低为27.5%,各处理间差异极显著;NANO_3既不利于菌落生长又不利于产孢。 腐皮镰刀菌分生孢子萌发对湿度的要求较高,只有在水滴中才能萌发,24h萌发率为82%。 胡萝卜培养基有利于菌落生长,5天后菌落直径最大为5.3 cm。 通气条件对腐皮镰刀菌菌丝生长影响较大,震荡培养菌丝平均生长量为725.6mg,静止培养菌丝平均生长量为483.1mg。在通气条件下腐皮镰刀菌分生孢子萌发率高于未通气的处理,但影响效果不明显,在不通气情况下,经过20小时,病原菌的孢子萌发率达到了77.10%,在通气条件下,病原菌的孢子萌发率达到了82.33%。腐皮镰刀菌分生孢子致死温度大约在57℃,10分钟。 利用含毒介质法对13种化学药剂进行室内毒力测定,结果表明:50%多菌灵(Carbendazim)、25%阿米西达(Azoxystrobin)、10%世高(Difenoconazole)和50%土菌速净(Tucsukin)在100mg/L浓度下抑菌效果十分明显,多菌灵对腐皮镰刀菌的抑菌率最高,达到100%。选取这四种药剂配制不同浓度梯度的含药培养基,进行抑菌试验,制作毒力回归方程。四种药剂的EC50分别为4.7760mg/L、7.2670 mg/L、7.8206mg/L、9.9099 mg/L。以此为依据进行四种药剂的混配实验筛选出5个增效配方:多菌灵∶土菌速净9∶1(Carbendazim∶Tucsukin)、多菌灵∶土菌速净8∶2(Carbendazim∶Tucsukin)、多菌灵∶土菌速净1∶9(Carbendazim∶Tucsukin)、阿米西达∶世高9∶1(Azoxystrobin∶Difenoconazole)和阿米西达∶世高3∶7(Azoxystrobin∶Difenoconazole),在5个浓度梯度下测定增效配方的EC50,其中阿米西达∶世高3∶7(Azoxystrobin∶Difenoconazole)的EC_(50)最小为3.2848mg/L。温室盆栽药效试验结果与室内毒力测定结果基本一致,均是阿米西达∶世高3∶7(Azoxystrobin∶Difenoconazole)对腐皮镰刀菌的抑制效果最佳。 测定各药剂的预防效果中,阿米西达∶世高(3∶7)、多菌灵∶土菌速净(1∶9)、多菌灵∶土菌速净(8∶2)、阿米西达∶世高(9∶1)、多菌灵∶土菌速净(9∶1)、25%阿米西达、50%多菌灵的预防效果达到了100%。测定各药剂的治疗效果中,多菌灵∶土菌速净(1∶9)、多菌灵∶土菌速净(8∶2)的治疗效果达到40%。


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