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半枝莲多糖的分离纯化和结构分析

宁欣  
【摘要】:半枝莲(Scutellaria barbata D.Don)又名牙刷草,唇形科黄芩属植物,常以干燥全草入药,主要分布于阿根廷、中国大陆和乌拉圭等地。多糖作为半枝莲中的主要活性物质,具有增强机体抗肿瘤能力,增加机体潜在的抗衰老作用,提高机体免疫力等多种重要的生物学活性,目前对于半枝莲多糖系统分离纯化及其结构分析方面的研究较少。为了深入了解半枝莲多糖的组成和结构,我们设计了本论文的研究内容,具体研究结果如下:以水煮醇沉的方法从半枝莲中提取半枝莲多糖WSBP,提取得率为8.9%。经测定,WSBP的总糖含量为60.7%,糖醛酸含量为14.9%,盐分含量为35.2%,蛋白质含量为1.9%。单糖组成分析表明,WSBP主要由GlcA、Man、GalA、Glc和Gal组成,此外还含有少量Rha和Ara。采用DEAE-纤维素离子交换层析分离的方法对WSBP进行分级,得到dH_2O洗脱的半枝莲中性糖级分WSBP-N和0.5 M NaCl溶液洗脱的半枝莲酸性糖级分WSBP-A,得率分别为50.8%和20.2%。采用去酯化酶解,离子交换层析和凝胶柱层析分离的方法对半枝莲酸性糖进行分离纯化,得到3个均一的级分WSBP-A-UD2a、WSBP-A-UD2b和WSBP-A-UD3。经分子量测定、单糖组成分析、FT-IR、部分酸水解、ESI-MS分析、甲基化分析以及核磁共振分析表明,WSBP-A-UD2b的分子量为5.1 KDa,为RG-II型果胶,其侧链B为带有0~1个乙酰基的9糖结构,侧链A为带有0~1个甲基的8糖结构,并且A链中的Fuc被Gal。WSBP-A-UD2a的分子量为578.1 KDa,WSBP-A-UD3的分子量为342.8KDa,WSBP-A-UD2a和WSBP-A-UD3的主链都是由1,2-连接的Man和1,4-连接的GlcA构成,其中Man的O-3位连有侧链,分支度为19.7%和11.3%,侧链主要以末端Gal形式存在,此外,WSBP-A-UD3中还存在少量α-1,6-Galp侧链结构。


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