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农杆菌介导的马铃薯GNA基因遗传转化及转基因马铃薯的抗蚜虫鉴定

侯书国  
【摘要】:GNA(雪花莲凝集素)是第一个利用甘露糖亲和层析法分离出的植物凝集素。因为它的甘露糖特异结合性,GNA被划分在单子叶植物甘露糖结合凝集素家族。研究表明,GNA能结合植物害虫肠道细胞的甘露糖残基,并且能够抵抗害虫肠道蛋白酶的降解,因此具有多种抗虫功效。因为GNA具有抗虫功效,利用GNA基因改良作物以增强其抗虫性的研究已被广泛进行。迄今,全世界已有十多种植物获得了转GNA基因抗虫植株,并且均表现出一定的抗虫性。 为了控制蚜虫本身对马铃薯造成的的危害,并切断由蚜虫引起的马铃薯病毒病的传播等问题,本实验建立了马铃薯的再生体系和农杆菌介导的马铃薯转化体系,利用农杆菌LBA1100 (含水稻韧皮部特异表达启动子启动GNA表达的双元载体pCAMBIA3300-GNA)介导转化三个马铃薯品种,转化后获得马铃薯再生植株113株。对转化后的马铃薯进行PCR、PCR-Southern、ELISA等分子生物学检测和抗除草剂鉴定,证明GNA基因已整合到马铃薯基因组。通过对转GNA马铃薯进行抗蚜虫鉴定,结果证明转GNA马铃薯对桃蚜具有显著的抗性作用。


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