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大豆(Glycine max)细胞质雄性不育系线粒体基因组的RAPD分析

黄福龙  
【摘要】: 植物雄性不育是植物界普遍存在的现象,它是利用杂种优势生产杂交种的基础,可以省去人工去雄,达到降低成本的目的。到目前为止,大豆已选育十几个不同且育性稳定的质核互作雄性不育系,并已初步实现利用杂种优势获得大豆产量上的突破,但对大豆细胞质雄性不育分子机理的研究还是较少。为此,本文以62对大豆细胞质雄性不育系及相应保持系为材料,采用RAPD分子标记技术对mtDNA基因组进行标记和多态性分析,并对获得的部分不育系和保持系特异谱带进行测序分析。 主要研究结果如下: 1.设置5个蔗糖梯度(30%,35%,40%,45%,50%)再经两次超速离心(35000rpm)分离线粒体可以保证分离到线粒体DNA的纯度,从而确保线粒体DNA的提取质量。 2.OPA-03、OPD-20、OPE-01、OPG-17、OPH-18、OPK-07、OPM-06、OPP-15、OPQ-12、OPQ-13、OPR-03等11个引物在保持系中扩增出特异产物,OPD-02、OPL-13、OPN-03等3个引物在不育系中扩增出特异产物,OPB-06、OPI-09、OPL-10等3个引物在保持系和不育系上均扩增出特异产物,但片段大小不同。这些特异的存在可能与大豆细胞质雄性不育的产生有关。 3.对上述扩增获得的部分目的片段(8个)进行了测序,除OPN-03扩增的特异片段为未知序列外,其它7个扩增的特异序列均与植物线粒体基因组都具有较高的同源性。这也进一步说明我们提取的线粒体DNA纯度较高。 4.引物OPA-03扩增的特异序列有71bp与拟南芥线粒体基因组中靠近cox1基因编码区上游一段序列相匹配,同源性达98%。由此推断,大豆细胞质雄性不育可能与CoxⅠ基因有关。


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