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人参花多糖的分离纯化、结构分析以及对淋巴细胞增殖的作用

王冰清  
【摘要】: 本文对人参花多糖进行系统的分离纯化,进而研究了它们的结构特征和对淋巴细胞增殖的作用。 干燥的人参花经过水提醇沉,得到人参花水溶性粗多糖GFL,HPLC分析单糖组成为Gal、GalUA、Glc和Ara组成。GFL经过DEAE-Cellulose柱层析分级,得到一个中性糖级分GFLN和四个酸性糖级分GFLA-1、GFLA-2、GFLA-3、GFLA-4。GFLN继续醇沉分级得到四个级分GFLN-I、GFLN-II、GFLN-III和GFLN-S。GFLA-2进一步通过DEAE-Sepharose FF柱层析分级,得到五个级分GFLA-2I、GFLA-2II、GFLA-2III、GFLA-2IV和GFLA-2V。 HPLC验证GFLN-II为均一的多糖级分,主要由Gal和少量Glc和Ara,HGPC检测其分子量为9×103Da。采用红外光谱分析、高碘酸氧化、Smith降解、甲基化分析、13C NMR分析对其进行结构研究,推测GFLN-II中的Gal主要以β-D-(1→4)连接构成,还有少量以1→6连接;Glc以1→4、1→4,6的方式连接;Man以1→3,4、1→2,4、1→3,6的方式连接;Ara以α构型存在,可能存在于端基或侧链位置。 体内实验研究人参花多糖各级分对ConA/LPS诱导的T/B淋巴细胞增殖能力的影响,人参花多糖的各级分中,GFLA-2、GFLN-II级分对ConA/LPS诱导的T/B淋巴细胞均有显著的刺激作用;GFLA-4对ConA诱导的T细胞有刺激作用。体外实验研究人参花多糖对ConA/LPS诱导T/B淋巴细胞增殖能力的影响,只有GFLA-4对于ConA诱导的T淋巴细胞增殖表现出促进效果。


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