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actin参与P53功能调节的初步探讨

王淑艳  
【摘要】: 肌动蛋白广泛存在于细胞核中,参与细胞核内的许多生命活动,例如染色质重塑,mRNA加工与输出、基因转录等。众多前人实验证据表明,细胞核内肌动蛋白是RNA聚合酶I、II和III所介导的高效率转录所必需的。细胞核肌动蛋白似乎在转录过程的许多步骤中都起作用,尤其是在转录复合物的起始聚集和转录延伸中。然而,对于细胞核肌动蛋白参与这些过程的机制还不是很清楚,至今为止,还没有明确证据表明在基因转录过程中,肌动蛋白是如何与转录调控因子之间进行协调的。 肿瘤抑制因子P53是一种高效的转录因子,应答于细胞内外的多种刺激信号,通过调节下游靶基因的转录引发多种类型的细胞活动,包括细胞周期调控,DNA修复,基因组稳定,细胞程序性凋亡,细胞分化、细胞衰老以及血管生成抑制等。由于P53的半衰期短,在正常情况下,细胞内P53维持在较低水平且处于休眠状态。当细胞受到刺激后,P53经多条途径而被翻译后修饰,稳定性提高,P53活化入核,在核内以四聚体的形式发挥其转录调节功能。 本文主要讨论了在DNA损伤条件下,肌动蛋白是否参与了P53所介导的生理过程。免疫荧光实验结果表明,UV照射能够引起G-肌动蛋白而不是F-肌动蛋白与P53的时空同步的核聚集。通过抑制肌动蛋白解聚的药物jasplakinolide以及抑制肌动蛋白聚合的药物swinholideA、细胞松弛素D、红海海绵素B刺激发现,肌动蛋白的动态变化参与了对P53入核过程的调控。荧光素酶双报告实验证明,在saos2(P53-\-)细胞中共转染肌动蛋白与P53能够促进P53对其靶基因p21的调控;转染P53结合jasplakinolide处理能够抑制P53对其靶基因p21的调控。在NIH3T3细胞中,转染肌动蛋白能够促进Doxorubicin刺激活化的P53对其靶基因p21的调控。这些结果显示,核内G-actin能够与P53协同作用,参与其对靶基因的转录调控。


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