收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

决定骨骼发育的转录因子的转录调控机制的研究

孙冬梅  
【摘要】: 骨是一个极其复杂、不断变化的组织,它的生长过程涉及诸多因素。转录因子是影响骨生长非常重要的因素。Runx2和Osterix是成骨细胞分化和功能及骨形成的两个重要的转录因子。在成骨细胞分化途径中,Osterix处于Runx2下游,但Osterix是否受Runx2的直接调控目前仍不清楚。 通过RT-PCR技术,我们发现在许多非成骨细胞系(包括已分化细胞和间质细胞)和成骨细胞系中瞬时表达Runx2能够诱导Osterix的表达。我们克隆了3.2kb人的Osterix基因5’侧翼区,并将启动子连接到报告基因上进行功能分析。结果显示Runx2能够上调该启动子的活性,并且进一步的实验又证明了在转录起始位点上游1.1kb和0.5kb之间的区域是维持启动子基本活性所必需,同时该区间也同Runx2的上调活性密切相关。在此区间内我们确定了一个Runx2的功能性结合位点“AGTGGTT”,此外还有另一个弱调节位点“TGTGGT”。以上实验数据支持Runx2参与调控Osterix基因的表达的假说。此外,在非成骨细胞中,瞬时转染和荧光素酶双报告实验显示Osterix能上调I-胶原蛋白的2.3kb启动子活性,但Runx2不能。这点差别暗示了在成骨细胞分化中处于Runx2下游的Osterix是激活I-胶原蛋白表达所必需的。 Sox9、L-Sox5和Sox6这三种转录因子是软骨细胞分化和软骨形成所必需的。它们共同作用足以诱导永久性软骨的形成。在软骨细胞分化过程中,这三种转录因子更为精细的调控机制还不为所知。我们利用反转录病毒系统建立了以ATDC5细胞为基础的,过表达L-Sox5、Sox6、Sox9和L-Sox5+Sox9的稳转细胞系,并通过Alcian blue、RT-PCR等方法检测软骨细胞分化程度。用抑制剂来确定与Stat1有关的各个稳转细胞的增殖情况以及MAPK所调节的分化情况。结果表明过表达L-Sox5和Sox6能加快软骨细胞增殖,抑制分化;过表达Sox9显著抑制增殖,但却能提高软骨特异性基因的表达。如果外源L-Sox5与Sox9的比例接1:1,便能使增殖和分化在很大程度上接近正常。此外Sox转录因子表达状态的变化能够调控Stat1的表达变化,也使MAPK途径产生不同应答。这些实验结果说明Sox转录因子之间的比例变化能够调控软骨细胞的增殖和分化。在软骨中,胞外信号之所以造就了不同类型的软骨细胞(增殖或分化)至少部分是通过建立不同的Sox比例实现的。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 许屏;王淑兰;叶耐永;;软骨细胞分化的萤光显微镜观察[J];吉林医科大学学报;1964年01期
2 张亚,王晓东,张德强,刘新晖,王科文,张锡庆;诱导人骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的实验研究[J];实用全科医学;2004年02期
3 晏杰;刘玲蓉;张其清;;诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的体外研究[J];中国修复重建外科杂志;2006年11期
4 李中华;栾保华;;体外诱导兔骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的实验研究[J];山东大学学报(医学版);2008年02期
5 许圣荣;赵劲民;苏伟;;骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的实验研究[J];广西医科大学学报;2010年05期
6 史增敦,莫东旭;低硒因素对诱导软骨细胞分化和骺生长板软骨发育的影响[J];中国地方病学杂志;1988年05期
7 颜炜群,杨同书,候立中,铃木不二男,加藤幸夫;伴刀豆蛋白A促进培养的静止软骨细胞分化[J];实验生物学报;1994年04期
8 裴明,曲绵域,于长隆;亡在软骨细胞分化调节中的作用[J];中华外科杂志;1998年11期
9 贾本让,张钦,孙正义,吴萌;骨髓间充质干细胞体外定向软骨细胞分化的研究[J];实用骨科杂志;2004年05期
10 林增平;钟继平;聂达荣;;人骨髓间充质干细胞的分离和培养及向软骨细胞分化的实验研究[J];中国现代药物应用;2014年15期
11 李秀森 ,郭子宽 ,刘晓丹 ,侯春梅 ,毛宁;人骨髓间充质干细胞的培养及向软骨细胞分化[J];解放军医学杂志;2002年12期
12 王武愉;张亚;王晓东;;诱导兔骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的实验研究[J];实用全科医学;2008年05期
13 吴家昌;杨彤涛;许啸;文艳华;韩建伟;范清宇;马保安;;人骨髓间充质干细胞体外向软骨细胞分化的实验研究[J];医学研究生学报;2010年02期
14 孙辉;刘俊宾;;细胞因子对软骨细胞分化形成的作用和影响[J];济宁医学院学报;2008年04期
15 艾国平,粟永萍,闫国和,王蒙,刘晓宏,罗成基,程天民;诱导骨髓间充质干细胞向成骨细胞和成软骨细胞分化[J];中国临床康复;2002年18期
16 崔玉明,胡蕴玉,吕昌伟,吕荣;诱导骨髓基质细胞向软骨细胞分化的实验研究[J];中国临床康复;2003年17期
17 王明海,王晓东,吴明媛,张锡庆,张德强,张亚,王科文,尹航,冯林,刘柏龄;人骨髓间充质干细胞向成骨细胞和成软骨细胞分化的能力(英文)[J];中国临床康复;2004年32期
18 霍建忠,蒋淳,郭常安,陈峥嵘;转化生长因子-β1基因修饰对骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的影响[J];中华手外科杂志;2005年04期
19 毛艳;张西正;;机械拉伸诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的实验研究[J];生物医学工程与临床;2006年S1期
20 黄定强,梁传余,李胜富,李国义;用单层培养法诱导兔骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的实验研究[J];山东医药;2003年03期
中国重要会议论文全文数据库 前7条
1 许圣荣;赵劲民;蒋宗滨;;骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的实验研究[A];第十五次长江流域麻醉学学术年会暨2010年中南六省麻醉学学术年会暨2010年湖北省麻醉学学术年会论文集[C];2010年
2 陈金武;王常勇;吴军正;郭希民;段翠密;董灵芝;;关节腔环境诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的实验研究[A];中国生物医学工程学会第六次会员代表大会暨学术会议论文摘要汇编[C];2004年
3 郑朝晖;朱平;李晓燕;尚鹏;王彦宏;樊春梅;贾俊峰;;骨髓间充质干细胞的分离培养及体内外诱导其向软骨细胞分化[A];第十届全国风湿病学学术会议论文集[C];2005年
4 胡煜;罗阳;曹丽华;高锦兰;李宝坤;;GDF5基因突变影响软骨细胞分化机制的研究[A];第八次全国医学遗传学学术会议(中华医学会2009年医学遗传学年会)论文摘要汇编[C];2009年
5 肖军;史占军;;RE-1元件辅助抑制因子对骨关节炎软骨细胞分化的调控作用[A];第20届中国康协肢残康复学术年会论文选集[C];2011年
6 毛艳;张西正;;机械拉伸诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的实验研究[A];天津市生物医学工程学会2006年学术年会论文摘要集[C];2006年
7 田娟;吕社民;;长期低剂量T-2毒素对软骨细胞分化关键基因表达的影响[A];第七届全国医学生物化学与分子生物学和第四届全国临床应用生物化学与分子生物学联合学术研讨会暨医学生化分会会员代表大会论文集[C];2011年
中国博士学位论文全文数据库 前3条
1 杨礼庆;胰岛素样生长因子-1基因转染对兔骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的影响[D];中国医科大学;2006年
2 王万宗;体外三维培养条件下转化生长因子β1基因转染的兔骨髓间充质干细胞促成软骨细胞分化的实验研究[D];第二军医大学;2006年
3 孙冬梅;决定骨骼发育的转录因子的转录调控机制的研究[D];东北师范大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 焦强;人骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的实验研究[D];山西医科大学;2004年
2 毛艳;力学作用对骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化影响的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2006年
3 林天;力学刺激对骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的研究[D];大连医科大学;2012年
4 刘艳娜;Ad-XBP1S腺病毒载体的构建及对软骨细胞分化的研究[D];重庆医科大学;2013年
5 黄艳丹;HDAC抑制剂诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化及机制的研究[D];浙江大学;2007年
6 李建林;瘦素对大鼠骨髓基质干细胞向软骨细胞分化过程及IGF-1表达的影响[D];华北煤炭医学院;2009年
7 林增平;不同力学刺激对人BMSCs向软骨细胞分化的实验研究[D];福建医科大学;2009年
8 熊奎州;猪骨髓基质细胞的分离培养及向软骨细胞分化的研究[D];西北农林科技大学;2008年
9 李祥柱;Ad-IRE1α腺病毒载体的构建及对软骨细胞分化与凋亡的效应研究[D];重庆医科大学;2012年
10 李中华;兔间充质干细胞分离培养和体外向软骨细胞分化的实验研究[D];山东大学;2008年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978