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甘草中黄酮类化合物的分离提取及抗氧化活性评价研究

王铎  
【摘要】:甘草为豆科植物甘草属(Glycyrrhiza uralensis Fisch)胀果甘草(Glycyrrhiza inflata Bat)或光果甘草(Glycyrrhiza glabra L)的干燥根及根茎,有调和诸药、解毒、补虚、止咳润肺等多种功能。本文采用多种提取方法对甘草中黄酮类化合物进行了对比提取,并优化提取方法,应用高速逆流色谱技术分离纯化甘草中黄酮单体,并采用体外活性实验评价了甘草总黄酮的抗氧化活性,对甘草黄酮的研究和开发提供了一定的实验依据和理论基础。 1.分别采用超声、回流、温浸、快速溶剂萃取法四种提取方法对甘草中黄酮类化合物进行了对比研究,并对快速溶剂萃取法和回流提取法进行了提取条件的选择和优化,以确定其最佳提取条件。结果表明,快速溶剂萃取法对甘草中总黄酮的提取效率要优于其它提取方法,快速溶剂萃取法的最佳提取条件为:提取时间为7 min,提取温度为120℃,提取次数为1次,乙醇浓度为70 %;回流提取法的最佳提取条件为:乙醇浓度80 %,提取时间1.5小时,提取次数为3次。 2.采用高速逆流色谱技术对甘草中黄酮类化合物进行分离提取研究,分别在276 nm和360 nm两个紫外检测波长下分离甘草中黄酮类化合物。在276 nm紫外检测波长下,溶剂系统为乙酸乙酯:乙醇:水(1:0.1:1,V/V/V),可以从甘草粗提物中分离得到两种化合物,分别为甘草素-4’-芹糖苷和甘草苷,纯度分别为95 %和97 %;在360 nm紫外检测波长下,溶剂系统为乙酸乙酯:甲醇:水(1:0.1:1,V/V/V),可以从甘草粗提物中分离得到两种化合物,分别为异甘草素葡萄糖芹菜苷和异甘草苷,纯度分别为92 %和91 %。 3.采用三种体外抗氧化活性方法对甘草提取液进行研究,分别考察了甘草四种提取方法的提取液在不同浓度下对DPPH·、O_2~-·、和H_2O_2的清除能力。结果表明,甘草提取液对DPPH·、O_2~-·、和H_2O_2都有清除能力,而且随着样品浓度的增加,清除能力都有所加强,快速溶剂萃取法所提取的甘草提取液的清除能力总体上要强于其它三种提取方法所提取的甘草提取液,甘草提取液对O_2~-·、和H_2O_2的清除能力均高于Vc。


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