HDYM-03产甘露聚糖酶高产突变株的选育及其粗酶性质的初步研究
【摘要】：
本论文重点介绍了以地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)HDYM-03为出发菌株诱变选育β–甘露聚糖酶高产突变菌株的研究工作,同时又对β–甘露聚糖酶产生菌HDYM-03的粗酶性质进行了初步研究。
β–甘露聚糖酶产生菌HDYM-03是由黑龙江大学微生物重点实验室从温水沤麻液中分离选育出来的,所产甘露聚糖酶活力达5122U/mL。以HDYM-03为原始出发菌株,先后选择紫外线(UV)、亚硝基胍(NTG)、亚硝基胍+紫外线(NTG + UV)、硫酸二已酯(DES)四种不同的理化因子进行诱变处理,在最佳诱变剂量条件下,通过对以上四种理化因子诱变效果进行综合评价,确定了亚硝基胍(NTG)诱变是诱变选育β–甘露聚糖酶高产突变株的最佳诱变方法,随后以亚硝基胍(NTG)单因子诱变出发菌株HDYM-03所得到的优良突变株N10-46为出发菌株进行又一轮NTG诱变,通过刚果红染色法初筛和DNS法测定甘露聚糖酶活力复筛,最终成功筛选得到一株β–甘露聚糖酶高产突变株,编号为:N10-46-85,该突变株遗传性状稳定,所产甘露聚糖酶活力达11651 U/mL。
对HDYM-03所产碱性β-甘露聚糖酶粗酶液性质的初步研究显示:酶热稳定较好(50℃),最适反应温度为40℃,在pH10.0-11.0之间最为稳定(剩余相对酶活在80%以上),大多数金属离子对其影响较小。
本研究在甘露聚糖酶的粗酶生产、亚麻生物脱胶工艺的完善、沤麻效率的提高等方面都将具有重要的应用价值。
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