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模拟微重力效应对人骨肉瘤细胞中心体及BUB1的影响

齐晶  
【摘要】: 空间环境对人体的主要影响因素是电离辐射和持续的微重力。已有研究表明空间微重力环境可导致宇航员的机体出现多种生理性和病理性改变。为了从细胞水平考察微重力效应对机体的损伤,本研究以人骨肉瘤细胞为实验材料,通过回转器模拟微重力效应,研究模拟微重力效应条件下人骨肉瘤细胞微管细胞骨架、中心体及纺锤体检验点蛋白BUB1的变化情况。研究结果表明:经过模拟微重力处理72小时后人骨肉瘤细胞U-2 OS细胞贴壁铺展程度降低,微管骨架有序性下降,排列紊乱。模拟微重力效应能够导致人骨肉瘤细胞U-2 OS纺锤体多极率增加,且随着模拟微重力时间的加长呈加大的趋势。虽然人骨肉瘤细胞系U-2 OS、MG-63和Saos-2中心体组份Centrin-2的免疫荧光结果表明人骨肉瘤细胞中在双极和多极纺锤体极区皆可检测到中心体的存在,但是Western Blot实验结果显示模拟微重力效应后中心体蛋白γ-tubulin表达量无明显上调,提示模拟微重力效应处理后出现的额外的中心体并不是由于发生中心体额外复制才出现的。实时定量PCR和Western Blot结果表明模拟微重力效应会导致U-2 OS和MG-63细胞纺锤体组装检验点蛋白BUB1 mRNA水平及蛋白水平表达量上调。关于上述模拟微重力效应影响中心体及检验点蛋白BUB1的结果在空间生物学的研究中还未见报道,因此对于空间生物学在相关方面的研究可能具有参考价值。


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