收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

哈茨木霉rac基因的敲除

范丽莉  
【摘要】:哈茨木霉是一种重要的生物防治真菌,能拮抗多种植物病原菌如立枯丝核菌、齐整小核菌、尖孢镰孢菌、烟草疫霉等。在哈茨木霉拮抗病原菌的过程中病原菌会产生物理或化学信号分子。这些信号分子与哈茨木霉上相应的信号分子受体结合使哈茨木霉上的受体激活。活化的受体会启动哈茨木霉细胞内多种信号传导途径从而使木霉发生一系列细胞功能的改变。小G蛋白耦联受体介导的信号转导是一种重要的信号转导途径。rac基因编码的RAC蛋白是小G蛋白超家族中Rho家族的成员。rac基因的功能在哺乳细胞中研究较深入但在丝状真菌中的研究相对较少。对该基因的深入研究有助于揭示木霉拮病原菌的分子机制,并为阐明哈茨木霉中小G蛋白耦联受体介导的信号转导通路奠定基础。 本实验以与哈茨木霉亲缘关较近的绿木霉为模板,通过设计一系列半随机引物的方法成功获得了哈茨木霉rac基因编码区及其上下游的DNA序列共2741bp。其中哈茨木霉rac基因编码区上游序列782bp,rac基因编码区990bp,rac基因编码区下游序列969bp。比较哈茨木霉rac基因完整编码区DNA序列与该基因的cDNA序列发现该基因编码区含有五个内含子,且五个内含子均以GT起始以AG结尾。将rac基因编码区DNA序列与全基因组测序的绿木霉,深绿木霉,里氏木霉DNA序列进行序列比对发现该基因编码区的DNA序列与绿木霉部分DNA序列相似性最高。 根据获得的rac基因编码区及其侧翼序列选择恰当的酶切位点构建了两种可以敲除哈茨木霉rac基因的质粒载体pPZPTtk8.10::rac::hyg1和pPZPTtk8.10::rac::hyg2。酶切鉴定结果和质粒测序结果都说明两种敲除质粒载体构建成功。利用根癌农杆菌介导的哈茨木霉遗传转化方法获得了一系列哈茨木霉转化子。通过正筛选和负筛选双重筛选,获得了敲除了rac基因的哈茨木霉突变菌株。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 苏林忠;;基于Oracle的高校数据中心建设方案的研究[J];河南师范大学学报(自然科学版);2011年04期
2 ;[J];;年期
3 ;[J];;年期
4 ;[J];;年期
5 ;[J];;年期
6 ;[J];;年期
7 ;[J];;年期
8 ;[J];;年期
9 ;[J];;年期
10 ;[J];;年期
11 ;[J];;年期
12 ;[J];;年期
13 ;[J];;年期
14 ;[J];;年期
15 ;[J];;年期
16 ;[J];;年期
17 ;[J];;年期
18 ;[J];;年期
19 ;[J];;年期
20 ;[J];;年期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 史怀;肖荣凤;张恒宇;朱育菁;刘波;;营养因素对哈茨木霉脂肪酸组成的影响[A];第三届全国微生物资源学术暨国家微生物资源平台运行服务研讨会会议论文摘要集[C];2011年
2 赵培洁;李良;叶理勋;;哈茨木霉防治白术白绢病[A];全国生物防治学术讨论会论文集[C];1991年
3 庄敬华;高增贵;陈捷;;哈茨木霉TA23防治番茄灰霉病的研究初报[A];中国植物病理学会第七届代表大会暨学术研讨会论文摘要集[C];2002年
4 肖荣凤;刘波;史怀;张衡宇;朱育菁;;土传病害生防菌哈茨木霉FJAT-9040的绿色荧光蛋白基因转化及其在土壤中的存活能力示踪[A];第三届全国微生物资源学术暨国家微生物资源平台运行服务研讨会会议论文摘要集[C];2011年
5 李梅云;谭丽华;王革;李天飞;刘开启;;哈茨木霉培养条件及对烟草疫霉生长的影响[A];中国植物病理学会2004年学术年会论文集[C];2004年
6 覃宏涛;肖晗;孙宗修;徐同;;哈茨木霉几丁质酶基因提高水稻抗病性研究[A];中国植病学会西南联合学术年会论文集[C];2000年
7 刘梅;乔敏;徐同;张克勤;;哈茨木霉液体发酵工艺研究[A];中国植病学会西南联合学术年会论文集[C];2000年
8 程东美;黄江华;刘任;向梅梅;;哈茨木霉对几种花卉土传病原真菌的拮抗作用[A];中国植物病理学会2004年学术年会论文集[C];2004年
9 朱双杰;张立付;高智谋;张胜利;;哈茨木霉TH-1菌株对植物的促生作用及其机制研究[A];中国植物病理学会2008年学术年会论文集[C];2008年
10 王耀荣;姚英明;冯桃;卢敏;沈琪;;阴离子型胺基芳氧基稀土金属胺化物催化rac-丙交酯和2,2-二甲基三亚甲基环碳酸酯聚合[A];2011年全国高分子学术论文报告会论文摘要集[C];2011年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 帅祎春;果蝇遗忘由小G蛋白Rac调控[D];清华大学;2009年
2 罗赫荣;生防木霉菌对土著根瘤菌固氮活性及遗传多样性影响的研究[D];湖南农业大学;2007年
3 韩芳;大黄鱼Ran、Rab、Rac分子特征和功能研究[D];湖南农业大学;2012年
4 杨力明;哈茨木霉几丁质酶V基因等克隆及其特性研究[D];哈尔滨工业大学;2008年
5 刘梅;利用生防木霉基因提高水稻抗病性研究[D];浙江大学;2003年
6 刘燕;哈茨木霉生物防治相关蛋白酶的基因克隆及功能研究[D];哈尔滨工业大学;2008年
7 魏林;哈茨木霉(Trichoderma harzianum)发酵液中对豇豆具促生活性物质的研究[D];湖南农业大学;2005年
8 黄彩红;哈茨木霉Chit37基因与Thi4基因的克隆与表达[D];哈尔滨工业大学;2008年
9 戴富明;拟南芥与核盘菌互作及与核盘菌、水稻白叶枯病菌相关的拟南芥突变体筛选[D];浙江大学;2006年
10 黄亚丽;农杆菌介导哈茨木霉转化系统优化及突变体分析[D];中国农业科学院;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 范丽莉;哈茨木霉rac基因的敲除[D];哈尔滨工业大学;2011年
2 张衡宇;植病生防菌哈茨木霉(Trichoderma harzianum)的研究[D];福建农林大学;2011年
3 范亮波;哈茨木霉菌Th-33T-DNA插入突变体库的构建及表型突变株的分析[D];中国农业科学院;2010年
4 沙莎;哈茨木霉菌发酵液提取物对黄瓜立枯病的生防作用及其抑菌活性成分的分离纯化[D];中国计量学院;2012年
5 黄有凯;哈茨木霉促进植物生长的相关研究[D];安徽农业大学;2003年
6 刘牧;哈茨木霉MFS外派泵基因Thmfs1的克隆和功能研究[D];中国计量学院;2012年
7 高广勋;Rac基因在恶性造血细胞中的表达及其对HL-60细胞增殖和凋亡的影响[D];第四军医大学;2005年
8 曾华兰;哈茨木霉T23及其防病作用研究[D];四川农业大学;2005年
9 姚琳;哈茨木霉诱导cDNA文库的构建及表达序列标签的分析[D];哈尔滨工业大学;2006年
10 孙斌;Rac、Cdc42信号转导通路的FRET单分子探针的特征分析[D];湖南师范大学;2008年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 杨晓;喜 中药材生物农药研成 惜 成果转化有政策瓶颈[N];四川日报;2007年
2 孙永泰;植物病虫的无公害防治[N];陕西科技报;2007年
3 冯瑞莉译;主机托管服务:企业节约资金之路[N];计算机世界;2001年
4 渠竞帆;明信片撬动图书市场[N];中国邮政报;2002年
5 本报记者 潘永花;让你的业务坚不可摧[N];网络世界;2001年
6 本报记者 潘永花;共同演绎的故事[N];网络世界;2002年
7 南京农业大学 王康才 唐晓清;玄参[N];江苏农业科技报;2002年
8 ;OracleWorld上的中国伙伴[N];计算机世界;2002年
9 李阅;明信片:配套营销 效果非凡[N];中国图书商报;2002年
10 方舟子;正视人类的多样性[N];中华读书报;2000年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978