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黄芩黄酮类化合物体外抗宫颈癌作用的研究

张艳霞  
【摘要】:宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤,严重威胁着妇女的生命健康。中药以其独特的抗肿瘤优势受到了越来越多的关注,黄芩是我国传统中药,黄酮类化合物是其有效活性成分,对多种恶性肿瘤均有良好的作用效果,而黄芩黄酮类化合物体外抗宫颈癌的研究还不够全面和深入。 本文从多个角度深入地探讨黄芩黄酮类化合物体外抗宫颈癌的作用效果和机制。采用乙醇回流法从黄芩中提取出黄酮类化合物,并运用酸沉碱溶法和AB-8大孔树脂吸附法进行分离和纯化。将高、中、低剂量的黄芩黄酮类化合物(浓度为250、175和100μg/ml)作用于体外培养的对数期人宫颈癌HeLa细胞,台盼蓝染色法和MTT检测细胞存活率,划痕愈合法检测细胞增殖和迁移的能力,同时,运用凋亡细胞形态观察法和流式细胞技术分析细胞凋亡率和DNA含量,Western blot检测周期蛋白表达,比色法检测Caspase-3活性。 试验表明,黄芩经提取纯化得到精制的黄酮提取物,提取率为3.68%,以黄芩苷作为标准品,分析得到黄酮类化合物的含量为21.18%。黄芩黄酮类化合物作用HeLa细胞后,细胞的增殖和迁移能力明显受到抑制,同时,处于S期的细胞百分比增大,Cyclin B1和CDK1蛋白的表达量减少,Caspase-3被激活,且这些作用呈现时间-剂量依赖性。黄芩黄酮类化合物可能通过下调细胞周期G2/M调控点Cyclin B1和CDK1蛋白的表达,将HeLa细胞阻滞于S期,来抑制癌细胞增殖,并且通过激活凋亡执行蛋白水解酶Caspase-3活性,诱导HeLa细胞凋亡。本研究初步揭示了黄芩黄酮类化合物体外抗宫颈癌的作用机制,为开发黄芩成为抗宫颈癌的天然药物提供有力的依据。


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