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SAg-SEB和MDV诱导雏鸡与荷瘤小鼠免疫学变化及细胞凋亡的研究

魏萍  
【摘要】: 近年来(1989年)已知超抗原(Superantigen SAG),包括SEB在哺乳动物可引起具有 TCR V_B片段T细胞超量增殖而后凋亡至无反应,并在诱导细胞免疫反应,抗肿瘤以及免 疫剂方面作用已得到证明,但在禽类尚未见报道,尚不知禽类是否具有类似机制,本实验 系首次探讨 SA_g在鸡体内的免疫诱导机制,并首次应用 Th_1细胞因子、细胞凋亡(apop tosis)检测剖析鸡马立克氏病(Marek’s Disease,MD)的免疫机制与SA_g的相关性, SAg-SEB与MDV对骨髓瘤荷瘤Balb/c小鼠的抗肿瘤作用,SA_g在马立克氏病防制中 的应用前景,以及MDV可能的SA_g作用。实验结果分析发现: 1.SA_g-SEB增强了胸腺细胞和脾淋巴细胞IL-2和IFN-γ的体外诱生能力和两种细 胞与骨髓巨噬细胞TNF细胞毒活性的体外诱生,提高了雏鸡的细胞免疫应答能力,抗肿 瘤能力,诱导细胞凋亡发生,强化雏鸡抵抗疾病的能力,其中高剂量导致短时加强后下降, 低剂量则导致缓升缓降作用。 2.MDV接种总体上降低IL-2和IFN-γ—1一Th_1细胞因子体外诱生,其中IL-2体外诱 生在胸腺细胞和脾淋巴细胞有差别,前者有早期(PI)短暂增强作用;而对TNF在上述两 种细胞和骨髓巨噬细胞的诱生作用呈现类似规律(仅对后者作用较小),即呈现“V”形曲 线,在接种后早期1~5天)和25天升高,而在10天开始下降,至第20天降至低谷,MDV 感染导致雏鸡细胞免疫水平下降,促进MD发病。 3.SEB减少了MDV感染雏鸡死亡数量并提高Th_1细胞因子水平以改善MDV感染 所致Th_1细胞因子减少的致病作用,即通过加强细胞免疫而增加抗感染和抗病作用。 4.SEB与MDV均引起雏鸡胸腺细胞和脾淋巴细胞凋亡,SEB接种脾细胞凋亡较胸 腺细胞严重,而MDV接种正相反,说明SEB主要诱导成熟T细胞凋亡,而MDV主要诱 导未成熟T细胞凋亡。 5.雏鸡胸腺脾细胞凋亡集中发生于T细胞和部分吞噬细胞,MDV接种组织学分布 与SA_g-SEB一致;均可见不同阶段凋亡细胞形态,包括浓缩核和凋亡小体,其降解表现为 吞噬细胞内和吞噬细胞外两种形式,以前者居多,后者部分存在,说明除吞噬外还有其它 凋亡细胞清除机制。SEB接种脾细胞凋亡存在内质网增多和线粒体增多现象,说明在细 胞凋亡过程中尚存在代谢和蛋白合成短时增强现象;MDV接种胸腺细胞常伴随后期坏 死现象。 6.SEB接种骨髓瘤Bal/c小鼠促使瘤/体重量比下降,而MDV接种则降幅较小,说 明 SA_g-SEB具有更强的肿瘤抑制或抗肿瘤作用,SEB接种并未增加脾/体重量比,而MD 接种则增加;在血液、肿瘤涂片与肿瘤、脾切片可见淋巴细胞增殖的母细胞化现象,MDV 接种主要引起脾淋巴细胞凋亡,而致肿瘤细胞凋亡作用轻;SEB接种很大程度上引起肿 瘤细胞和脾淋巴细胞发生凋亡。说明SEB与MDV致细胞凋亡作用具有靶细胞差别;SEB 和MDV不仅诱导细胞凋亡,而且诱导细胞坏死、增殖和转化。


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