大豆灰斑病种质资源遗传多样性的RAPD和SSR分析

【摘要】： 大豆灰斑病（Cercospora sojina Hara）是世界性病害，也是我国东北大豆主要病 害之一，危害非常严重。本研究收集了黑龙江省94份大豆灰斑病种质资源，利用RAPD 和SSR技术对种质资源间的遗传关系、大豆灰斑病10个生理小种的专化抗性进行了研 究。主要研究结果如下： 1.对94份大豆灰斑病种质资源进行了10个生理小种的抗性鉴定，并用RAPD技术 研究了种质资源间的遗传关系。其中，抗8个生理小种以上的材料共有17份，感8个生 理小种以上的材料共有15份。41条引物共扩出485条带，多态条带总数为145条。材 料间的相似系数介于0.43-0.96。用SSR技术对其中48份进一步进行了研究。61个SSR 引物共在48个大豆品种或品系中得到197个等位基因，材料间的相似系数介于0.17-0.92。 2.根据大豆灰斑病种质资源10个生理小种的抗感鉴定结果与RAPD和SSR的分子 数据，得到了许多与各生理小种专化抗性有关的分子标记。相似度大于0.7，Fisher准确 性测验达到显著相关的有RAPD引物C07-2、F02-3、Q12-3和SSR引物Sat_108-b、 Sat_121-b、Satt049-c、Satt199-b、Satt239-c、Satt247-d、Satt303-b、Satt371-a、Satt453-a、 Satt516-c、Satt543-b、Satt587-a、Sct_186-a、Sct_186-e、Sct_186-f、Sct_189-b、SOYPRP1-a， 可以建立各生理小种的分离群体进一步确定连锁距离。 3.对RAPD、琼脂糖分离的SSR、聚丙烯酰胺分离的SSR在揭示大豆灰斑病种质 资源平均等位基因数、预期异质结合度和相似系数进行了比较。结果表明：聚丙烯酰胺 分离的SSR得到的平均等位基因数最多，预期异质结合度最大，相似系数最低；琼脂糖 分离的SSR次之；RAPD再次。说明聚丙烯酰胺分离的SSR揭示种质资源多态能力最 强。SSR聚类结果与RAPD技术有差异，但两种SSR技术聚类结果吻合得很好，相关 系数达到显著水平。 4.本实验结果表明：40566、40567、91-135、东农39；9674；1574、1572三组抗 病材料在聚类树状图上分组明显，说明这三类抗病材料抗性来源有可能不同，可作为亲 本相互杂交以富集不同抗性，拓宽今后育成品种的遗传基础。 5.RAPD和SSR数据聚类结果表明：大豆灰斑病种质资源的部分材料是同一育种单 位内的聚到一起，而大部分材料是各育种单位间相互交织在一起。说明了各育种单位材 料间亲缘关系相近，抗病育种选择的亲本间亲缘关系相近。黑龙江省大豆灰斑病种质资 源的遗传基础狭窄，急需拓宽，以育出抗性更强、抗谱更广、抗病更持久的品种。