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小尾寒羊妊娠中后期胎盘和子宫颈成熟的监测

葛利江  
【摘要】: 本研究选择13只成年健康妊娠小尾寒羊和11个妊娠中后期的小尾寒羊妊娠子宫,分别在妊娠第80~85d、100~105d、120~125d、135~140d和分娩当天采集颈静脉血液和羊水并经剖腹或屠宰取子宫颈、母体子宫阜和子宫阜间组织、胎儿子叶和叶间组织,每期采集4~5份。通过目测、光镜和电镜对妊娠子宫的形态学、样本组织的显微结构和超微结构进行观测;通过放免法、比色法和TUNEL法对血清中的细胞因子(肿瘤坏死因子、白细胞介素-1β和白细胞介素-6)、雌二醇(E_2)和雌三醇(E_3)、血清和羊水中的纤维粘连蛋白和一氧化氮(NO),各期组织中的细胞凋亡数量进行测定;通过蛋白质酶谱及印迹法对金属蛋白酶2(MMP2)和9(MMP9)进行分析,以监测妊娠中后期胎盘和子宫颈成熟。结果如下: 1.形态学观测:小尾寒羊妊娠80d和100d的最大胎盘突直径明显大于以后三个时期的直径(P<0.05,或P<0.01),在妊娠80d时最大的胎盘突平均直径达10.76±0.72cm,妊娠120d以后的各时期最大胎盘突直径已无显著差异,胎盘已趋于成熟。 羊水和尿水容量随着妊娠的延长明显增加,但最具有实际意义的还是两者比例的改变,在妊娠80d时,羊水容量显著高于尿水容量,两者之比为3.85;到妊娠100d时,两者容量都明显增加,但两者之间差距减少,两者之比为1.22;到妊娠120d时,尿水容量超过羊水容量,两者之比为0.82;到妊娠140d和足月时,羊水和尿水容量已趋于稳定,两者之比分别为0.97和1.01。上述羊水和尿水容量的比值变化说明,随着妊娠进展胎儿新陈代谢逐渐增强,胎盘的营养运输功能和代谢产物排出功能也在逐渐完善。胎盘到妊娠140d左右已趋于成熟。 子宫颈长短、直径和质地的变化可以反映子宫颈成熟状况。在妊娠80d、100d和120d,子宫颈较长,直径较小,质地较硬。到妊娠140d时,子宫颈开始变短,直径开始增大,质地中等硬度,开始向成熟发展。 2.胎盘细胞凋亡:胎盘中常见的凋亡细胞是合体滋养层细胞(ST),而妊娠中后期细胞滋养层细胞(CT)和血管内皮细胞凋亡现象少见。随着妊娠时间的延长,凋亡细胞数量在不断增加,到分娩时达到最高值,但与妊娠140d凋亡的数量相比,增加幅度不显著,这说明在妊娠140d左右,胎盘趋于成熟。 子宫颈与胎盘之间细胞凋亡的数量变化相似,即在分娩时数量最多,所不同的是子宫颈以成纤维细胞凋亡为主。妊娠140d时,成纤维细胞胞浆内就出现大量的脂褐素小体,这意味着这种细胞开始衰退,凋亡即将发生。从宫颈的凋亡数量上看,妊娠140d时,子宫颈即将成熟。 3.小尾寒羊血清中IL-1β和IL-6含量仅在妊娠120d时显著高于各自的对照组(P<0.01),而妊娠各个时期以及分娩时的血清TNF-α含量都高于或显著高于对照组的含量(P<0.01或P<0.001)。随着妊娠进展,血清IL-1β、IL-6和TNF-α的含量都逐渐增加,妊娠120d时都达到最高值,分别为0.390±0.196ng/ml,579.8±152.8pg/ml和2.348±0.397ng/ml。而后,三种细胞因子含量都逐渐下降,到分娩前略有回升,但仍低于妊娠120d的最高值。由于从妊娠140d至分娩时三种细胞因子含量基本稳定,由此表明, 东北农业大学农学博士学位论文 一 胎盘于妊娠 IAN左右基本成熟。W Q还参与小尾寒羊分娩的启动。 4.与空怀对照组浓度(2.721.cd um肌 相比,小尾寒羊在妊娠前四个时期NO浓 度均较高(大干 DAs7.21 IDOI/L)(P<0.05),雕吩妓时急剧下降,潍 4WIH VIDOVL(P>0D5)。羊水中NO$&&fl;于血清中NOng的波动曲线,但各阶段NO 的浓度要比血清中的砌凶B一些,由此证明NO对维持妊娠起着重要作用。 5.从妊娠中期到妊娠末期,小尾寒羊羊水中纤维粘连蛋白浓度,随着妊娠期的延长 而逐渐下降,并且在妊娠lthe时下降幅度最大,明 氏于前三个妊娠时期的浓度(Ped.01 或P<(.001),到分娩时降到最低值175士0.83 v w。这预示着母体胎盘和胎)U抬盘连 接开始疏松。 6.与空怀对照组浓度(4.981if.003gb)相比,小尾寒羊妊娠n、IAn、IAN和 140d以及分娩时的血清E3浓度(5.05(h.qM,4568ed.492,5.43()ti.p,4.78521.038 和4.957ed.679ntw)的劫氏无显著变化(PDeo.05),这说明小尾寒羊血清中的E3不能 象高级灵长类动物的马那样能代表胎盘和胎儿的发育程度,所以不gffi示胎盘成熟。 与空怀对照组浓度(13.697rt.odgPtw)相比,小尾寒羊妊娠 n、IAn和IAN的 马浓度高低无显著变化O>005);sde娠IAn时升高,为14.ffiot7.881ng,但和 对照组相比差异不显著(P>0.05);而到分娩当大骤然升高,达到最高浓度 (1册.293 Zn.掐“旮d)(P<0刀1),这说明雌二醇参与分娩的启动。 7.在小尾寒羊妊娠中末期,胎盘和子宫颈超微结构有以下特点:(1)在妊娠elAn 期间,母体子宫阜和胎儿子叶血管中存在许多早幼红细胞、中幼红细胞、幼巨核细胞、 嗜酸中幼粒细胞和嗜碱中幼粒细胞,¥蜘娠IAn和分娩时,胎盘突中上述细胞数量减少, 这说明胎盘在妊娠中期具有较强的造血功能,以后随着胎盘和胎儿的成熟,胎盘造血功 g骗溺,胎JLHWh:nr


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