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不同培养条件对分蘖洋葱试管鳞茎形成的影响

姜玉东  
【摘要】:以茎尖为外植体,探索分蘖洋葱的组培技术,在此基础上,采用由外植体诱导形成试管苗,再诱导试管鳞茎的技术途径,从培养条件入手,探索试管鳞茎微繁技术,以解决传统接口技术上的弊端,为无毒种苗试管鳞茎的工厂化生产提供理论依据和关键技术。结论如下: 1.试管苗的组培技术 (1)MS+NAA0.1mg/L+BA0.7mg/L和MS+NAA0.1mg/L+2iP0.7mg/L培养基都适合诱芽培养。 (2)MS+IBA2.5 mg/L和1/2MS+IBA1.5 mg/L +NAA0.05mg/L培养基都适合生根培养。 (3)提高C/N比值有利于生根培养。 (4)较低浓度的IBA或NAA有利于生根培养,IBA的生根效果优于NAA。 2.试管鳞茎的微繁技术 (1)糖源 试管苗在以蔗糖(化学纯及分析纯)、葡萄糖或绵白糖为糖源的培养基上都能正常生长,果糖不适合生长,可溶性淀粉不能用作糖源;试管苗在以蔗糖(化学纯及分析纯)、葡萄糖、果糖或绵白糖为糖源的培养基上均能形成鳞茎,以分析纯蔗糖的效果最好,鳞茎发生数和鲜重分别达到39.67个和64.93mg,化学纯蔗糖其次,绵白糖居中,葡萄糖和果糖效果最差;绵白糖也是试管苗生长及鳞茎形成的良好糖源,可作为蔗糖的替代品。 (2)糖浓度 较高的糖浓度抑制试管苗生长,试管苗难于抽叶生根及吸收水分;在一定范围内,提高糖浓度促进鳞茎形成。糖浓度越高,鳞茎形成越早。但浓度过高(150g/L)会削弱形成效果;120g/L的蔗糖浓度最适合鳞茎化培养,鳞茎平均发生数和形成率分别达到31.33个和90.00%。 (3)植物激素 在无激素或BA和(或)NAA浓度较低时有利于鳞茎形成;NAA1.0mg/L最适合鳞茎化培养,鳞茎直径和鲜重分别达到4.02mm和115.73mg。 (4)多效唑 在一定范围内,提高多效唑浓度有利于鳞茎形成,但浓度过高(10.0mg/L)会削弱形成效果;添加5.0mg/L多效唑最适合鳞茎化培养,鳞茎发生数、形成率、直径、鲜重和指数分别达到41.00个、92.86%、11.55mm、709.06mg和1.10;多效唑具有很强的矮化和抑制生长效果,一定范围内,效果随浓度的升高而加强,有鳞茎指数1的情况出现,鳞茎从长圆渐变成扁圆形;多效唑具有延缓生长的效果,鳞茎形成过程约需150d以上;在添加多效唑的培养基上形成的鳞茎呈淡绿色,紫红色外皮较少。 (5)烯效唑 一定范围内,提高烯效唑浓度有利于鳞茎形成;添加1.0mg/L烯效唑最适合鳞茎化培养,鳞茎发生数、形成率、直径和指数分别达到45.67个、93.34%、8.52mm和1.21;烯效唑具有强烈的促进生根效果,试管苗根系繁密;烯效唑具有较强的矮化效果,一定范围内,效果随浓度的升高而加强,有鳞茎指数1的情况出现,鳞茎由长圆渐变成圆形;烯效唑具有延缓生长效果,鳞茎形成过程约需150~210d以上;在添加烯效唑的培养基上形成的鳞茎呈淡绿色,紫红色外皮较少。 (6)活性炭 WP=9 活性炭具有很强的促进生长和生根效果;活性炭具有较强的促进鳞茎形成效果,在1~5g/L范围内,提高活性炭浓度有利于鳞茎形成,各处理鳞茎形成率均高达90%以上,其中添加3~5g/L的鳞茎形成率高达100%,但添加5g/L会轻度削弱鳞茎形成效果;添加4~5g/L活性炭最适合鳞茎化培养,鳞茎发生数、直径、鲜重和指数分别达到44.33个、7.82mm、656.91mg和1.68;在添加活性炭的培养基上形成的鳞茎较长,鳞茎指数较大,具有紫红色外皮。 3.试管鳞茎的播种栽培 将试管鳞茎按直径大小分成A:0~3mm、B:3~6mm、C:6~9mm和D:9~12mm四个等级,经播种栽培后成活率分别为63.33%,86.67%、100%和100%;萌发苗长势随直径的增大而增强。


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