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达氟沙星防治史氏鲟Ah感染的应用评价

卢彤岩  
【摘要】:达氟沙星(Danofloxacin)是一动物专用的氟喹诺酮类药物,具有水溶性好、可多种途径给药、抗菌谱广、抗菌活性强、药动学特性优良、不良反应小及与其他抗菌药物无交叉耐药性等优点,目前已被广泛应用于兽医临床治疗各种畜禽细菌性感染疾病。 史氏鲟肉厚骨软,味道鲜美,具有很高的经济价值,我国正在形成一个人工养殖鲟鱼的热点。但伴随鲟鱼养殖集约化程度的提高, 由嗜水气单胞菌( Aeromonas hydrophila,Ah)引起的细菌性疾病也成为这一养殖新品种健康可持续发展的一个制约因素,急需有效的药物进行防治。喹诺酮类药物如恩诺沙星、噁喹酸、诺氟沙星等已被陆续应用于水生动物疾病的防治,但有关达氟沙星在水产养殖业中使用的评价尚未见到相关的报道。 本研究选取具有广阔应用前景的动物专用抗菌药物——达氟沙星,应用微生物学、药效学、药动学和毒理学的实验手段,首次较全面系统地研究了达氟沙星对Ah 体外抗菌活性及4 种理化因子对其影响、对感染Ah 史氏鲟治疗效果、达氟沙星在健康及感染Ah 史氏鲟体内的药动学特征、生物利用度、达氟沙星在史氏鲟血浆及肝脏、肾脏、肌肉和鳃等组织内的残留检测方法及残留规律、达氟沙星对史氏鲟的安全性评价等。旨在评价达氟沙星用于史氏鲟细菌性疾病防治的可行性及安全性,从而为渔用药物的使用科学化和规范化提供理论依据。实验结果如下: 1. 应用二倍稀释法测定达氟沙星对Ah 的体外抗菌活性及培养基酸碱度(pH)、镁离子(Mg~(2+))、细菌接种量及小牛血清对达氟沙星最小抑菌浓度(Minimal inhibitory concentration,MIC)及最小杀菌浓度(Minimal bactericidal concentration,MBC)的影响。达氟沙星对Ah 的MIC 和MBC 分别为0.05 mg·L~(-1) 和0.1 mg·L~(-1)。达氟沙星在培养基pH为8 时的抗菌活性最强,MIC 和MBC 分别为0.025 和0.05 mg·L~(-1),降低或升高培养基的pH 均导致抗菌活性的降低。培养基中的血清浓度达到50%以上时,对MBC 的影响比较明显。细菌接种量达到107 CFU·mL~(-1) 时对抗菌活性表现出抑制作用。Mg~(2+)对其MIC和MBC 均有明显的影响。 2. 中、高剂量(10、20 mg·kg~(-1))的达氟沙星对感染Ah 的治疗效果与恩诺沙星(10 mg·kg-1)相当,受试鱼的死亡率均为0,有效率100%,优于氟苯尼考(50 mg·kg~(-1))和新诺明(100 mg·kg~(-1))。 3. 采用反相高效液相色谱法测定以10 mg·kg~(-1) 剂量静脉注射和经口灌服给药后史氏鲟血浆中达氟沙星的药物浓度。该法采用C18 色谱柱,流动相为乙腈-水相(15:85),荧光激发波长和发射波长分别为280 nm 和450 nm,样品用甲醇沉淀蛋白,离心取上清液进样。达氟沙星在0.005~1.0 μg·mL~(-1) 范围内线性关系良好,本方法的最低检测限为0.005 μg·mL~(-1)。 健康组单剂量静注达氟沙星(10 mg·kg~(-1)),其药时数据符合无吸收的三室开放模型,方程为C=5.830-5.582t+4.162-1.157t+0.852-0.029t,主要动力学参数如下:t1/2α0.552 h;t1/2β22.186 h;AUC34.226 mg·(L·h)~(-1);Vl 0.922L·kg~(-1);Vb10.144 L·kg~(-1);kel0.317 h~(-1)。Ah 感染组的Vl 由0.922 减小到0.290 L·kg~(-1), AUC 由34.226 降低至28.157 mg·L·h~(-1),CLB 由0.292 增至0.355L(kg·h)~(-1)。 健康组经口灌服给药(10 mg·kg-1)药时数据符合一级吸收二室开放模型,血药浓度


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