收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

胸膜肺炎放线杆菌菌影(Ghost)的制备及其免疫效力评价

常月红  
【摘要】: 猪传染性胸膜肺炎(Porcine contagious pleuropneumonia,PCP)是由胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)引起的以肺出血、坏死和纤维素性渗出为主要病变的高度接触性传染病。自1957年Pattison首次报道本病以来,在世界范围内广泛流行,并给各国养猪业带来了严重的经济损失。目前,国内主要使用灭活疫苗预防和控制本病,但由于APP血清型较多,灭活疫苗对不同血清型APP的交叉保护效果十分有限,因此开发新型疫苗已经成为研究热点。 本实验通过PCR技术扩增噬菌体PhiX174的溶菌基因E,将该基因连接到含有λPL/PR-cI857启动阻遏系统的pBV220载体中,从而使溶菌基因E和启动阻遏系统λPL/PR-cI857串联成为温度敏感的溶菌盒E-λPL/PR-cI857,构建重组质粒pBV-E。再将含有E基因的溶菌盒插入到App-E.coli穿梭载体pGZRS-18中,成功地构建App-E.coli穿梭溶菌质粒pGZRS-Eλ。采用电击穿孔法将其转入胸膜肺炎放线杆菌APP1型shope 4074菌株中,含有裂解质粒的胸膜肺炎放线杆菌在28oC条件下生长到对数生长期,然后添加氯霉素至终浓度1μg/ml,升温到42oC诱导其溶解,制成了胸膜肺炎放线杆菌菌影。电镜观察菌影细胞形态完整保持了细菌的基本细胞形态,内容物全部被释放到胞外,细胞表面发生明显的皱缩。本实验构建的溶菌质粒pBV-E和pGZRS-Eλ在各自宿主菌中的溶菌效率分别达到了99.86%和99.99%。本实验为进一步研究菌影这一新型菌苗及佐剂形式奠定了基础。 将胸膜肺炎放线杆菌菌影疫苗以5×109cfu/只的剂量分两种方式对实验猪进行免疫:实验Ⅰ组(肌肉注射免疫组)、实验Ⅱ组(滴鼻免疫组)和对照组,实验组每组6只,对照组4只。进行猪的免疫攻毒保护实验。免疫共分2次,每次间隔两周。第2次免疫后第14d,分别以APP1型菌(5×109cfu)和APP2型菌(5×109cfu)进行攻毒。以APP1全菌体为包被抗原,间接ELISA方法检测血清抗体水平。结果表明,1免1周后肌肉注射APP Ghosts免疫后猪血清抗体水平明显上升,与滴鼻免疫组和对照组相比差异显著(p 0.05)。1免2周抗体水平略有下降,2免1周后抗体水平明显上升。2免2周后肌肉注射免疫组抗体水平略有上升,与滴鼻免疫组和对照组相比差异极显著(p 0.01)。而滴鼻免疫组与对照组的差异始终不显著(p 0.05)。攻毒2周后,根据攻毒后猪的存活率、肺脏病理变化及间接免疫荧光检测,综合评价胸膜肺炎放线杆菌菌影疫苗的免疫保护效果。结果表明,通过肌肉注射胸膜肺炎放线杆菌菌影疫苗可以激发动物体内产生较好的免疫应答,并明显优于滴鼻免疫组。本研究制备的胸膜肺炎放线杆菌菌影具有良好的应用前景,为猪传染性胸膜肺炎新型疫苗的研制提供参考。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前6条
1 天翼;Ghost软件的简易使用方法[J];四川农机;2003年01期
2 李红旗,罗北;Ghost软件的应用及注意的几个问题[J];农业网络信息;2005年01期
3 陈荣柱,孟庆君;GHOST在电算化中的应用[J];农村财务会计;2003年10期
4 刘仲义;刘尘尘;;GHOST在零维护微机系统中的应用[J];西昌学院学报(自然科学版);2008年01期
5 郭晋太;数据备份大师Norton Ghost2003全接触[J];计算机与农业.综合版;2003年03期
6 常月红;刘思国;王春来;王勇;刘建东;宫强;邵美丽;郭设平;;细菌ghost疫苗的研究进展[J];畜牧兽医科技信息;2008年05期
中国重要会议论文全文数据库 前9条
1 伍应艳;张树道;廖振民;袁仙春;;用Ghost Fluid方法耦合流体和固体计算[A];中国工程物理研究院科技年报(2003)[C];2003年
2 程军波;唐维军;李德元;;利用Ghost Fluids方法模拟接触间断[A];中国工程物理研究院科技年报(2001)[C];2001年
3 ;Scattering-free ghost imaging[A];第十五届全国量子光学学术报告会报告摘要集[C];2012年
4 Lu Zhang;Yunjie Xia;;Multi-wavelength differential ghost imaging[A];第十六届全国量子光学学术报告会报告摘要集[C];2014年
5 蒲旭;王建勇;范小明;;GHOST:作者名字排歧系统[A];NDBC2010第27届中国数据库学术会议论文集(B辑)[C];2010年
6 Deyang Duan;Lu Zhang;Yunjie Xia;;Visible ghost imaging with nonvisible light[A];第十六届全国量子光学学术报告会报告摘要集[C];2014年
7 闫广武;;可压缩格子Boltzmann模型中的基本问题——兼谈Ghost分布[A];第十六届全国流体力学数值方法研讨会2013论文集[C];2013年
8 姚阳;李平;柏劲松;姜洋;裴晓阳;钟敏;;Euler-Lagrange耦合计算的GEL方法[A];中国工程物理研究院科技年报(2008年版)[C];2009年
9 廖世得;罗诚;邹瑜;;启动U盘制作及其在发射机工控设备中的应用[A];中国新闻技术工作者联合会第六次会员代表大会、2014年学术年会暨第七届《王选新闻科学技术奖》和优秀论文奖颁奖大会论文集(二等奖)[C];2014年
中国硕士学位论文全文数据库 前5条
1 常月红;胸膜肺炎放线杆菌菌影(Ghost)的制备及其免疫效力评价[D];东北农业大学;2008年
2 叶恩茂;医学磁共振EPI中Ghost伪影消除方法研究[D];第一军医大学;2006年
3 左凌飞;StarCraft:Ghost Spectres翻译实践报告[D];广西民族大学;2013年
4 王宁;表达幽门螺杆菌鞭毛粘附素的重组大肠杆菌ghost型疫苗的制备及鉴定[D];第三军医大学;2005年
5 代佳岳;Pac-Man游戏中NPC的进化神经网络学习方法[D];河北大学;2012年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 柳坚;启动盘造成Ghost大提速[N];电脑报;2003年
2 yss_email;思考:使用Ghost前问自己六个问题[N];电脑报;2003年
3 福建 陈芬;巧用Ghost Explorer隐藏私人文件[N];电脑报;2004年
4 安徽 李红;Ghost另类技巧大放送[N];电脑报;2004年
5 江西 汤丽华;我用Ghost[N];中国电脑教育报;2000年
6 陈锟;Ghost的两个另类用途[N];中国电脑教育报;2002年
7 梁季秋;Ghost遇到新问题[N];中国电脑教育报;2004年
8 季长秋;都是“Ghost”惹的祸[N];中国电脑教育报;2005年
9 ;Ghost的几点使用经验[N];中国计算机报;2003年
10 廖勇军;GHOST的另类妙用[N];中国计算机报;2003年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978