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双孢蘑菇营养菌丝老化现象的研究

王博  
【摘要】: 双孢蘑菇Agaricus bisporus是一种食用担子真菌,世界上有七十多个国家栽培双孢蘑菇,是世界栽培最普遍和最广泛的商业蘑菇之一。随着栽培量的逐渐增大,其菌种的生产数量和质量的要求也相应提高。但是由于管理不善、缺乏知识、保藏菌种的条件不高等原因,菌种的老化问题很严重。老化问题直接影响了菌种的质量,因此双孢蘑菇的产量也受到影响。随着菌龄的增长,菌种的活力等各方面生理特性都相应下降,即菌丝老化。因而探索出菌丝老化的机理、延缓双孢蘑菇菌丝的老化和检测菌丝老化的形态是科研工作和生产实践中迫切需要解决的问题,同时为双孢菇的菌种老化问题的研究提供理论依据。主要研究结果如下: 1.通过设计小麦培养基不同的含水量(35%、40%、45%、50%、55%)、不同浓度(0.1%、0.3%、0.5%、0.7%、0.9%)的FeSO_4、Ca(H_2PO_4)_2、MgSO_4、CaCO_3、KH_2PO_4 5种无机盐及不同浓度的发酵牛粪(15%、20%、25%、30%、35%、40%),观察其对菌丝老化程度的影响。试验表明含水量为45%的小麦培养基,延缓菌丝老化的作用最明显;添加5种无机盐对双孢蘑菇菌丝老化均有一定的抑制作用,添加0.9% Ca(H_2PO_4)_2的和0.1%~0.9% MgSO_4的对双孢蘑菇菌丝的老化抑制作用最明显;添加发酵牛粪的延缓双孢蘑菇菌丝老化有一定作用,但是效果不明显。 2.通过对不同菌龄的双孢蘑菇菌丝显微形态学观察,试验表明菌丝在培养50-60d后,菌丝中开始出现细胞胀大、细胞壁变形等现象,并且随着时间的增长这类菌丝的比例越来越大。因此双孢蘑菇菌丝老化时间可能是从接种后的50-60d开始的。随着菌丝菌龄的增长,老化现象越来越严重。细胞壁膨胀甚至破裂,最终菌丝失去原有形态而细胞壁瓦解。 3.通过对不同菌龄双孢蘑菇菌丝的生长活力和RNA含量检测,表明双孢蘑菇菌丝的生长速度随着菌龄增长而降低:接种菌龄30d的菌丝生长速度为1.8cm/d,菌龄150d的菌丝生长速度降低为0.96cm/d;萌发时间随菌龄增长而升高:接种菌龄30d的菌丝萌发时间为1.5d,菌龄150d的菌丝萌发时间升高为5d;菌丝的RNA含量随着菌龄增长而降低:接种菌龄30d的RNA含量为2231.2ng/μl,菌龄150d时RNA含量降低为438.9 ng/μl。 4.通过对不同菌龄双孢蘑菇菌丝的过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、酸性磷酸酶(ACP)的酶活性测定,表明菌龄对过氧化物酶、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶的活性影响没有呈规律性变化,随着菌龄的增加酸性磷酸酶的活性降低,菌龄30d时最高为1.91nmole/g.min,最低为150d时0.52 nmole/g.min。


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