收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

‘津田’芜菁MYB类转录因子BrMYB77的克隆及遗传转化

阎淑滑  
【摘要】:转录因子对植物自身的生长发育及环境等因素的应答反应具有重要的调控作用。MYB类转录因子是最大的植物转录因子家族成员之一,参与了细胞分化、激素和环境因子应答等生物过程,并对植物次生代谢、花色素形成过程以及叶片等器官形态建成具有重要的调节作用。本文以花青素合成光敏感型‘津田’芜菁(Brassica rapa'Tsuda')为试验材料,通过同源克隆的方法获得一个MYB类转录因子基因,序列比对分析发现与拟南芥MYB77转录因子基因具有很高的同源性,将其命名为BrMYB77基因,并对其进行亚细胞定位等研究,以期为MYB类转录因子的功能研究提供基础。主要研究结果如下: 1、通过同源克隆的方法,以‘津田’芜菁幼苗总RNA为模板,RT-PCR扩增得到一个MYB类转录因子基因,序列比对分析发现与拟南芥MYB77转录因子基因具有很高的同源性,将其命名为BrMYB77基因。生物信息学分析表明BrMYB77基因具有两个MYB结构域,是典型的R2R3MYB转录因子基因。 2、将BrMYB77基因与荧光蛋白基因融合,构建荧光表达载体GFP-BrMYB77,真空渗透法转化洋葱表皮细胞进行瞬时表达,荧光显微镜观察结果表明,BrMYB77蛋白定位于细胞核。 3、将BrMYB77基因插入到pGEX-KG载体中,构建原核表达载体pGEX-BrMYB77, IPTG诱导目的蛋白表达,通过SDS-PAGE和Western bloting验证GST-BrMYB77融合蛋白的表达。纯化GST-BrMYB77融合蛋白,为进一步研究BrMYB77蛋白的功能奠定了基础。 4、利用Gateway技术构建植物表达载体pCAMBIA1301-PMI-BrMYB77载体,通过农杆菌介导的方法转化番茄。通过甘露糖抗性和PCR筛选鉴定阳性苗。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 陈清;汤浩茹;董晓莉;侯艳霞;罗娅;蒋艳;黄琼瑶;;植物Myb转录因子的研究进展[J];基因组学与应用生物学;2009年02期
2 杨晓磊;卢德勋;高民;卢媛;;猪脂肪细胞分化转录因子的研究进展[J];畜牧与饲料科学;2008年03期
3 赵艳;刘晓鑫;张庆林;王英;李景文;王庆钰;;大豆种子特异性启动子研究进展[J];大豆科学;2010年01期
4 金慧;栾雨时;;转录因子在植物抗病基因工程中的研究进展[J];中国生物工程杂志;2010年10期
5 邱志刚;刘沛;翟朝增;徐兆师;李连城;陈明;马有志;;小麦TaBS1转录因子基因的克隆、原核表达及Western blot检测[J];麦类作物学报;2011年02期
6 刘坤;单国芳;李付广;刘传亮;张朝军;张雪妍;武芝侠;;海岛棉ERF族转录因子EREB6基因克隆及特征分析[J];河南师范大学学报(自然科学版);2011年02期
7 陈俊,王宗阳;植物MYB类转录因子研究进展[J];植物生理与分子生物学学报;2002年02期
8 滕勇,杨海明,经荣斌;POU1F1基因结构特征及其与遗传性疾病的相关性研究[J];吉林农业大学学报;2004年03期
9 王呈玉;张明哲;万生生;吕世友;马兰青;李彦舫;;短芒大麦DREB1基因的克隆与特性分析[J];吉林农业大学学报;2006年05期
10 陈金焕;夏新莉;尹伟伦;;植物DREB转录因子及其转基因研究进展[J];分子植物育种;2007年S1期
11 蒋瑶;胡尚连;孙霞;黄胜雄;;拟南芥bZIP基因家族系统发育树比较分析[J];华北农学报;2008年01期
12 李昊文;赵军;;非生物逆境信号转导的分子机制[J];中国农业科技导报;2008年S1期
13 晁月文;李竞芸;张广辉;;彩叶植物呈色机理及其育种研究进展[J];江苏林业科技;2008年04期
14 王晓飞;程宪国;王迎波;吴庆钰;白由路;梁永超;;Floral-dip法大豆GmDREB转录因子转拟南芥研究[J];生物技术通报;2008年05期
15 郭兆奎;杨谦;颜培强;万秀清;;黄花烟草K~+通道基因NKC1克隆与序列分析[J];中国烟草学报;2008年05期
16 王育娜;贺俐;曹蕾;赖燕;牟少亮;何水林;;辣椒推定WRKY基因cDNA的生物信息学分析[J];中国农学通报;2008年11期
17 陈坚;兰涛;段远霖;刁志娟;童治军;连肖华;吴为人;;水稻中SUSIBA2相似基因RNA干扰体系的建立[J];福建农林大学学报(自然科学版);2009年01期
18 梁崇;冯宇梅;彭日荷;熊爱生;薛永;李贤;姚泉洪;黄英金;;水稻WRKY16基因分析及其转化拟南芥研究[J];上海农业学报;2009年03期
19 王琦琳;牛向丽;刘永胜;;玉米两个功能未知转录因子基因的转录后加工[J];应用与环境生物学报;2009年04期
20 王丽芳;杜希华;于涌鲲;赵福宽;孙清鹏;;番茄WRKY转录因子基因片段的克隆及序列分析[J];中国农学通报;2009年23期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 伍翀;杨兆春;秦双双;袁媛;黄璐琦;陈平;;植物MYB转录因子研究进展[A];中华中医药学会第十届中药鉴定学术会议暨WHO中药材鉴定方法和技术研讨会论文集[C];2010年
2 高峰;夏瑞强;熊爱生;肖宁;洪义欢;姚泉洪;陈建民;;水稻AP2/EREBP类转录因子基因的功能研究[A];江苏省遗传学会植物分子育种学术研讨会论文摘要汇编[C];2007年
3 邸鹏;陈万生;张磊;;构建“转录因子-启动子”耦联载体开展植物生物碱次生代谢工程[A];中国植物学会七十五周年年会论文摘要汇编(1933-2008)[C];2008年
4 吴艳;徐岚;周迎会;吴士良;;人类β1,3半乳糖基转移酶7(UDP-Gal:betaGlcNAc beta 1,3-galactosyltransferase polypeptide 7)催化功能的研究以及该基因表达与转录因子ets-1的相关性的探索[A];2008年全国糖生物学学术会议论文摘要[C];2008年
5 吴艳;徐岚;吴士良;;人类β3GalT7/GNT8 (UDP-Gal:betaGlcNAc beta 1,3-galactosyltransferase polypeptide 7)催化功能的研究以及该基因表达与转录因子ets-1的相关性的探索[A];华东六省一市生物化学与分子生物学会2008年学术交流会论文摘要汇编[C];2008年
6 李肖霞;宋一萌;朱振久;付成来;李承红;朱毅;;转录因子KLFs在血管内皮祖细胞增殖分化中的作用[A];第七届海峡两岸心血管科学研讨会论文集[C];2009年
7 李蕾;谢丙炎;戴小枫;杨宇红;;辣椒抗病相关WRKY转录因子基因的分离及特征分析[A];中国植物病理学会2006年学术年会论文集[C];2006年
8 郭振飞;赵雅清;;黄花苜蓿EREBP基因的克隆、表达及功能鉴定[A];2007年全国植物生长物质研讨会论文摘要汇编[C];2007年
9 郑毅;陈永平;;转录因子FoxO1与肝纤维化[A];传染病诊治高峰论坛暨2007年浙江省感染病学、肝病学学术年会论文汇编[C];2007年
10 周贤尧;刘红霞;董娜;张增艳;;抗性相关转录因子TaPIMP1基因的分离和功能的初步研究[A];2009年中国作物学会学术年会论文摘要集[C];2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 高建杰;苹果两个MYB转录因子基因的克隆与功能分析[D];南京农业大学;2011年
2 刘翔;与海岛棉纤维发育相关AG-Subfamily和MYB类转录因子的功能研究[D];上海交通大学;2009年
3 白延红;烟草花青素合成相关基因及转录因子基因的克隆与功能验证研究[D];西北农林科技大学;2012年
4 董娜;病原诱导的小麦ERF、MYB转录因子基因TaPIEP1和TaPIMP1的分离、特性及功能分析[D];中国农业科学院;2008年
5 庄静;大白菜和甘蓝型油菜AP2/ERF家族转录因子的克隆与分析[D];南京农业大学;2009年
6 邱志刚;小麦DREB/ERF转录因子相互作用蛋白质的筛选与验证[D];中国农业科学院;2010年
7 姚春霞;GATA转录因子对心肌能量代谢及细胞增殖的调控机制研究[D];郑州大学;2012年
8 赵珏;转录因子Spr2调控中胚层形成和神经外胚层后部化[D];清华大学;2004年
9 李雪平;大豆DREB类转录因子基因的克隆及功能研究[D];中国农业大学;2004年
10 何莉;转录因子CTCF的功能研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 阎淑滑;‘津田’芜菁MYB类转录因子BrMYB77的克隆及遗传转化[D];东北林业大学;2011年
2 刘淑君;番茄MYB转录因子的鉴定及其表达分析[D];浙江师范大学;2012年
3 潘宝华;桑树苯丙氨酸解氨酶和MYB转录因子基因克隆与表达分析[D];江苏科技大学;2011年
4 蒙华;苦荞MYB转录因子基因的克隆及转录激活功能鉴定[D];四川农业大学;2011年
5 魏潇;红根甘肃桃(Prunus kansuensis L.)抗根结线虫相关MYB转录因子基因的克隆与定位[D];中国农业科学院;2010年
6 魏礼玲;MYB转录因子家族相关EST干涉载体构建及遗传转化的研究[D];华中农业大学;2010年
7 高哲;基于PWMSA算法拟南芥协同基因调控的预测[D];吉林大学;2009年
8 杨红梅;赤霉素相关转录因子NBF的进一步功能分析[D];新疆大学;2005年
9 张传庆;T-bet/IFN-γ信号转导在重型再生障碍性贫血发病机制中的作用[D];苏州大学;2008年
10 赵学强;通心络对自发性高血压大鼠心肌重构干预的实验研究[D];山东大学;2008年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 王小龙;科学家提高了多功能干细胞安全性[N];科技日报;2009年
2 白毅;UXT蛋白可增强转录因子NF—κB活性[N];中国医药报;2007年
3 香港麦迪信医学出版有限公司 供稿;凋亡与肿瘤:一对矛盾的连体婴[N];医药经济报;2002年
4 陈勇;专家有突破 借助基因杀死癌细胞[N];人民日报;2005年
5 本报记者 冯卫东;向左分裂向右分化[N];科技日报;2009年
6 记者 陈勇;美专家绘出大脑关键区域基因“分布图”[N];新华每日电讯;2004年
7 记者胡德荣;我国科学家培育出猪“万能”干细胞[N];健康报;2009年
8 胡德荣;我国揭示NF—κB细胞核内调控新机制[N];中国医药报;2007年
9 杨茜;美建立造血干细胞分化调控模型[N];中国医药报;2006年
10 黄苏榕;中科院上海神经所发现中、小脑发育不全分子机制[N];中国医药报;2007年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978