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舞毒蛾NPV多角体蛋白基因的克隆、测序和表达

林同  
【摘要】: 本论文对舞毒蛾核型多角体病毒(LdMNPV)进行了克隆、测序和表达。首先纯化 了LdMNPV,然后从LdMNPV中提取总DNA,以primer 1(5' CC CAT ATG CAC AAC TTT TAC AAC TAC 3')和primer 2(5' CC AAG CTT AGT ACG CCG GTC CTTG 3')为引物,LdMNPV为模板做PCR,克隆出LdMNPV多角体蛋 白基因。将该基因连接到T-Vector上,通过筛选,得到含LdMNPV多角体蛋白基因的 T-Vector阳性克隆。 对T-Vector上的LdMNPV多角体蛋白基因进行序列测定表明,LdMNPV多角体蛋 白基因的ORF有735个碱基,其中有两个碱基与文献中(Ian R.L.Smith等,1988)记载的 不同,即文献中的序列第378位上是C,第507位是T;本论文测得的相应位置的碱基 分别是T和C,但它们所编码的氨基酸却相同,即分别编码精氨酸和异亮氨酸。 以质粒pT7-7为载体、大肠杆菌BL21(D E3)为受体菌对LdMNPV多角体蛋白 基因进行了原核表达。


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