舞毒蛾NPV多角体蛋白基因的克隆、测序和表达

【摘要】： 本论文对舞毒蛾核型多角体病毒（LdMNPV）进行了克隆、测序和表达。首先纯化 了LdMNPV，然后从LdMNPV中提取总DNA，以primer 1（5' CC CAT ATG CAC AAC TTT TAC AAC TAC 3'）和primer 2（5' CC AAG CTT AGT ACG CCG GTC CTTG 3'）为引物，LdMNPV为模板做PCR，克隆出LdMNPV多角体蛋 白基因。将该基因连接到T-Vector上，通过筛选，得到含LdMNPV多角体蛋白基因的 T-Vector阳性克隆。 对T-Vector上的LdMNPV多角体蛋白基因进行序列测定表明，LdMNPV多角体蛋 白基因的ORF有735个碱基，其中有两个碱基与文献中（Ian R.L.Smith等，1988）记载的 不同，即文献中的序列第378位上是C，第507位是T；本论文测得的相应位置的碱基 分别是T和C，但它们所编码的氨基酸却相同，即分别编码精氨酸和异亮氨酸。 以质粒pT7-7为载体、大肠杆菌BL21（D E3）为受体菌对LdMNPV多角体蛋白 基因进行了原核表达。