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利用绿僵菌防治舍恩菲尔德异丽金龟研究

贾春生  
【摘要】: 本文对利用绿僵菌(Metarhizium anisopliae)防治舍恩菲尔德异丽金龟(Anomala schoenfeldti)进行了研究,研究内容包括:绿僵菌的分离和筛选、对寄主专化性、与化学农药的相容性、与化学农药混用的增效作用及其增效作用的产生机理。研究结果如下: (1)通过虫体直接分离法和选择性培养基从舍恩菲尔德异丽金龟和土壤中共分离出绿僵菌、球孢白僵菌、卵孢白僵菌和玫烟色拟青霉4种120株。其中,从舍恩菲尔德异丽金龟幼虫分离出33株,依次是绿僵菌22株、球孢白僵菌7株、卵孢白僵菌2株、玫烟色拟青霉2株;分离到的绿僵菌都是分生孢子小型的M.anisopliae var anisopliae,没有分离到分生孢子大型的M.anisopliae var.majus。 (2) 采用3级筛选法,筛选出1株杀虫活性高、耐高温、分生孢子形成良好的绿僵菌ASMa-9802菌株,其对舍恩菲尔德异丽金龟3龄幼虫的致死中浓度(LC_(50))为2.2×10~5conidia/ml;在5.0×10~7conidia/ml和1.0×10~7conidia/ml处理下的致死中时间(LT_(50))分别为7.3±1.Od和8.5±1.Od。 (3)ASMa-9802菌株具有很高的寄主专化性。研究发现这种寄主专化性主要是由于分生孢子在寄主表皮的附着和萌发的差异而产生的。 (4)在培养基中,ASMa-9802菌株对绝大多数的有机磷杀虫剂以及全部的氨基甲酸酯类和拟除虫菊酯杀虫剂具有很强的耐性,而对昆虫生长调节剂的耐性差。但经土壤实验表明,即使在培养基中对ASMa-9802菌株分生孢子萌发影响很大的杀虫剂,在土壤中对菌株也几乎无影响。 在培养基中,测试的16种杀菌剂中的绝大部分都对ASMa-9802菌株的分生孢子萌发或菌丝生长发育有影响,影响最大的是有机硫类杀菌剂和苯并咪唑类杀菌剂。 在常规使用浓度时,环草啶、草甘膦、二甲戊乐灵、氟草定和2,4-D对ASMa-9802菌株的菌丝生长都没有影响,而其余的4种除草剂辟哒酮、异丙甲草胺、甜菜宁和甜菜灵对菌丝的生长影响很大。 在紫外线(波长256nm、剂量825μW/cm~2)的照射下,ASMa-9802菌株在2.0×10~7、5.0×10~6conidia/ml的低浓度区,菌株的致病力随着照射时间的增加不断地下降,24h后都下降了约60%,但在6.0×10~8conidia/ml的高浓度区,其致病力不随照射时间而变化,均为100%左右。 (5)室内实验表明,ASMa-9802菌株与杀虫剂混用时,所有药剂及其不同浓度都提高了杀虫效果。尤以与倍硫磷和杀螟硫磷(2.0μg)的混用增效作用最明显,且前者的增效幅度和速度都优于后者。ASMa-9802菌株与昆虫生长调节剂混用时,农梦特和氟虫脲可以产生明显的增效作用。定虫隆和ASMa-9802菌株混用后未显示出明显的增效作用,米螨与ASMa-9802菌株混用不能产生增效作用。 在5d内,ASMa-9802×杀螟硫磷混用处理区的幼虫摄食量(0.96±0.75g)比对照区有明显下降,下降了约45%。但由于实验时间短,单独与混用处理区之间的幼虫摄食量并未见有明显差异。 在野外盆栽草坪防治实验中,ASMa-9802菌株与倍硫磷(100 u g)和氟虫腺(50 u g)混用对1龄幼虫的防治效果明显高于单独处理区。而与杀螟硫磷混用处理的防治效果 不太稳定;在野外苗圃防治实验中,ASMa9802菌株和倍硫磷单独处理区以及二者的混 用区的舍恩菲尔德异丽金龟幼虫的存活数都降低了,每个样方(20X20X20 cm)幼虫存 活数分别为2.0、1.2、l刀头(对照区样方幼虫存活数为5.0头)。由于样方中的幼虫存 活数少,各药剂处理间的差异不显著。在ASMa-9802菌株单独处理区发现有感染死亡的 幼虫,表明尽管当时土壤温度较低,可是也有一定的防治效果。 门)健康的舍恩菲尔德异丽金龟3龄幼虫体液中的血细胞总量约28,000/yi,其中,颗 粒细胞数量最多,约 16,000/HI,其次为浆细胞,数量约 8,000/ul。 在ASMa9802菌株与杀螟硫磷混用处理区,血细胞总数减少的幅度较人,接种6d 后,最多比健康幼虫减少约川000…1;在杀螟硫磷的胁迫作用下,接种*S*个9802菌 株的各处理区的3龄幼虫体液中的浆细胞数量随着接种时间的变化不大,与无处理区的 健康幼虫体液中的浆细胞无显著差异;在杀螟硫磷单独处理区,处理3d后颗粒细胞数量 开始减少,与无处理区健康幼虫相比,IVI体液中的血细胞数量约减少了5,000个。在 ASMa9802菌株单独处理区,处理后的第3日未见颗粒细胞数量减少,但第5日以后颗 粒细胞数量减少得最显著,处理后的第5日后lul体液中的颗粒细胞数量约减少8,000 个。在ASMa9802菌株处理区,可见许多颗粒细胞积聚起来排除异物的被囊化作用。 杀螟硫磷 X ASMa9802混用对幼虫体液中的酚氧化酶活性产生了非常明显的抑制 作用。 处理24h后,在ASMa9802菌株单独处理区,分生抱子几乎全部从幼虫腹节两侧上 脱落了,而在 ASMa9802 X杀螟硫磷的混用处理区,仅有约半数的分生抱子脱落。 在ASMa9802菌株单独处理区,幼虫在土壤中运动时造成的分生抱子从幼虫表皮的 脱落率超过了 85%,而在 ASMa9802 X杀螟硫磷混用处理区,分生抱子脱落得非常少, 仅为15%左右。


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