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射干麻黄汤对慢性哮喘小鼠气道炎症和气道重塑的影响

张丽  
【摘要】: 目的:观察射干麻黄汤对哮喘小鼠PPAR-γ、DC及TGF-β1表达的影响,探讨其在气道炎症和气道重塑两方面治疗哮喘的作用机制,为临床应用提供实验依据。 方法:健康清洁级雌性BALB/c小鼠60只,随机分组,每组10只。分组如下:A组(正常对照组),B组(哮喘模型组),C组(地塞米松组),D组(低剂量中药组),E组(中剂量中药组),F组(高剂量中药组)。B、C、D、E、F组建立慢性哮喘模型。D、E、F组小鼠予不同剂量的射干麻黄汤灌胃;C组予地塞米松腹腔注射。取材后,对各组小鼠采用双抗体夹心ABC-ELISA法检测BALF中TGF-β1的含量;半定量评定支气管周围炎症细胞浸润程度、杯状细胞比例;图像分析测量血管管壁厚度、气管平滑肌层厚度、气道旁和血管旁胶原纤维含量;透射电镜观察DC形态;免疫组化染色检测肺组织DC、TGF-β1及PPAR-γ表达情况;RT-PCR技术检测肺组织PPAR-γmRNA的表达水平;Western blot技术检测肺组织PPAR-γ在核蛋白中表达强度;实时定量PCR技术检测肺组织TGF-β1mRNA表达水平。 结果: 1、与正常组比较,模型组炎症细胞浸润程度明显加重,肺组织杯状细胞评分及BALF中的白细胞总数、EOS、淋巴细胞等均明显增高,均有显著性差异(P0.05);低、中、高剂量射干麻黄汤组较模型组炎症细胞浸润程度、肺组织杯状细胞评分及BALF中的白细胞总数、EOS、淋巴细胞均降低,有显著性差异(P0.05);中、高剂量组与地塞米松组效果相近,无显著性差异(P0.05);中、高剂量组效果相近,无显著性差异(P0.05)。 2、与正常组比较,模型组哮喘发作程度明显加重,肺组织血管管壁厚度、气管平滑肌层厚度、气道旁和血管旁胶原纤维含量明显增加,均有显著性差异(P0.05);中、高剂量组较模型组哮喘发作程度减轻,肺组织血管管壁厚度、气管平滑肌层厚度、气道旁和血管旁胶原纤维含量均明显降低,有显著性差异(P0.05);中、高剂量组与地塞米松组比较,无显著性差异(P0.05);中、高剂量组效果相近,无显著性差异(P0.05)。 3、与正常组比较,模型组DC数量明显增加,有显著性差异(P0.05);低、中、高剂量射干麻黄汤组较模型组DC数量降低,有显著性差异(P0.05);中、高剂量与地塞米松组效果相近,无显著性差异(P0.05);中、高剂量组效果相近,无显著性差异(P0.05)。电镜下,A组和B组小鼠肺组织DC呈典型表现,C、D、E、F组小鼠DC呈不典型表现。 4、与正常组比较,模型组肺组织PPAR-γ数量、PPAR-γmRNA及PPAR-γ在核蛋白中表达均明显增加,有显著性差异(P0.05);地塞米松组较模型组PPAR-γ数量、PPAR-γmRNA及PPAR-γ在核蛋白中表达明显减少,而中、高剂量射干麻黄汤组PPAR-γ数量、PPAR-γmRNA及PPAR-γ在核蛋白中表达明显增强,均有显著性差异(P0.05);中、高剂量组效果相近,无显著性差异(P0.05)。 5、与正常组比较,模型组BALF中TGF-β1含量、肺组织TGF-β1数量、TGF-β1mRNA表达强度明显增加,有显著性差异(P0.05);低、中、高剂量射干麻黄汤BALF中TGF-β1含量、肺组织TGF-β1数量及TGF-β1mRNA表达较模型组均明显降低,有显著性差异(P0.05);中、高剂量组较地塞米松组效果相当,无显著性差异(P0.05);中、高剂量组效果相近,无显著性差异(P0.05)。 结论:1.射干麻黄汤可降低哮喘小鼠肺组织DC数量。2.射干麻黄汤可降低哮喘小鼠BALF中TGF-β1含量、肺组织TGF-β1数量及TGF-β1mRNA表达强度。3.射干麻黄汤可增加哮喘小鼠肺组织PPAR-γ数量,增强PPAR-γmRNA表达及PPAR-γ在核蛋白中的表达强度。4射干麻黄汤可通过影响DC、TGF-β1及PPAR-γ表达情况,抑制哮喘气道炎症和重塑,从而达到治疗哮喘的目的。


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